附文獻(xiàn)丨艾美捷T7 RNA聚合酶說明書
艾美捷T7 RNA聚合酶化學(xué)性質(zhì)：
T7 RNA?聚合酶是一種依賴?DNA?的?RNA?聚合酶，其對(duì)噬菌體?T7?啟動(dòng)子序列有高特異性。該酶從?T7?啟動(dòng)子插入到轉(zhuǎn)錄載體下游的?DNA?上合成大量?RNA。
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應(yīng)用：標(biāo)記和未標(biāo)記的?RNA?轉(zhuǎn)錄本的合成。
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來源：從在質(zhì)粒上表達(dá)?T7 RNA?聚合酶基因的大腸桿菌純化獲得。
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性能和質(zhì)量檢驗(yàn)：3′ 和?5′ 脫氧核糖核酸外切酶、核糖核酸酶和?DNA?缺口檢測；
轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中的性能。
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單位定義：一個(gè)單位是指在1 hr?內(nèi)、37°C?下，以?T7?轉(zhuǎn)錄載體作為模板，將?1 nmoL?核糖核苷酸水解為酸性可沉淀物質(zhì)所需要的酶量。
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單位反應(yīng)條件：40 mM Tris-HCl (pH 8.0)、25 mM NaCl、8 mM MgCl2、2 mM?亞精胺-(HCl)3、5 mM DTT、0.4 mM ATP、0.4 mM CTP、0.4 mM GTP、0.4 mM UTP、1μCi [3H]GTP、1 μg SphI-cut pT7L13?和酶（50 μL、10 min.、37°C?下）。
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艾美捷T7 RNA聚合酶內(nèi)容與儲(chǔ)存：
T7 RNA?聚合酶配有一瓶?5X?反應(yīng)緩沖液?[200 mM Tris-HCl（pH?值?8.0）、40 mM MgCl2、10 mM?亞精胺-(HCl)3、125 mM NaCl]?和一瓶?100 mM DTT。保存于?-20°C。
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艾美捷T7 RNA聚合酶文獻(xiàn)參考：
1、Novel binding of HuR and poly(C)-binding protein to a conserved UC-rich motif within the 3'-untranslated region of the androgen receptor messenger RNA.
Yeap Bu B; Voon Dominic C; Vivian Julian P; McCulloch Ross K; Thomson Andrew M; Giles Keith M; Czyzyk-Krzeska Maria F; Furneaux Henry; Wilce Matthew C J; Wilce Jackie A; Leedman Peter J;
J Biol Chem (2002) 277:27183-27275
2、Principles of 3' splice site selection and alternative splicing for an unusual group II intron from Bacillus anthracis.
Robart AR, Montgomery NK, Smith KL, Zimmerly S,
RNA (2004) 10:854-862
