耐冷凍款細(xì)胞工廠

—— FREEZER-SAFE ——

在疫苗研發(fā)中，工藝開發(fā)是關(guān)鍵環(huán)節(jié)。生產(chǎn)過程包括細(xì)胞培養(yǎng)、發(fā)酵以及后續(xù)的各種疫苗純化步驟。

動物用疫苗開發(fā)的工藝路線

在基于細(xì)胞培養(yǎng)的疫苗生產(chǎn)過程中，目標(biāo)產(chǎn)物留在細(xì)胞內(nèi)，需要采取措施使細(xì)胞裂解，以將產(chǎn)物釋放到細(xì)胞周圍的液體中，便于進(jìn)行后續(xù)各種產(chǎn)物純化步驟。

細(xì)胞裂解方法

CELL LYSIS METHOD

成敗關(guān)鍵：細(xì)胞培養(yǎng)器皿耐冷凍性能！

化學(xué)裂解和酶裂解通常是比較溫和的方法，包括SDS 和溶菌酶處理等。機(jī)械裂解可以更均一的裂解細(xì)胞，主要采取反復(fù)凍融法。

與化學(xué)裂解相比，反復(fù)凍融法具有更高的裂解效率。反復(fù)凍融法原理：將細(xì)胞在-20攝氏度以下冰凍，室溫融解，反復(fù)幾次，由于細(xì)胞內(nèi)冰粒形成和剩余細(xì)胞液的鹽濃度增高引起溶脹，使細(xì)胞結(jié)構(gòu)破碎。

因熱脹冷縮的原理，細(xì)胞培養(yǎng)器皿裝入培養(yǎng)基并擰上密封蓋冷凍后，底層或頂層可能會發(fā)生輕微變形，這是一種不可避免的正常現(xiàn)象。低溫反復(fù)凍融對細(xì)胞培養(yǎng)器皿的耐冷凍性能有極高的要求。

NEST細(xì)胞工廠-耐冷凍款

FREEZER-SAFE

采用粘膠工藝

耐受-18～-20℃冷凍

抗冷凍性能★★★★★

• 對NEST 10層細(xì)胞工廠-耐冷凍款進(jìn)行抗冷凍性能測試。

1.取3個NEST 10層細(xì)胞工廠-耐冷凍款，輻照后按200mL/層加入結(jié)晶紫溶液，擰緊密封蓋。

2.放入-18至-20攝氏度冰箱中冷凍48小時后取出。

3.待完全融化后，平放12小時、側(cè)放（4個邊分別進(jìn)行側(cè)放）各 2小時，觀察有無漏液體。

將產(chǎn)品進(jìn)行電子束輻照后,充壓8Kpa，保壓90秒，重復(fù)兩次，兩次間隔4小時以上，均無漏氣現(xiàn)象則為合格產(chǎn)品。

NEST 10層細(xì)胞工廠-耐冷凍款經(jīng)密封性檢測全檢后產(chǎn)品均無滲漏。

第一次凍融測試

第二次凍融測試

第三次凍融測試

NEST 10層細(xì)胞工廠-耐冷凍款經(jīng)過-18 至-20攝氏度3次反復(fù)凍融后，產(chǎn)品底層或頂層出現(xiàn)正常的輕微變形，但未出現(xiàn)漏液現(xiàn)象，抗冷凍性能up up up！

• 對NEST 10層細(xì)胞工廠-耐冷凍款進(jìn)行保壓性能測試。

將產(chǎn)品進(jìn)行電子束輻照后,充壓8Kpa，保壓90秒，重復(fù)兩次，兩次間隔4小時以上，均無漏氣現(xiàn)象則為合格產(chǎn)品。

• 對NEST 10層細(xì)胞工廠-耐冷凍款進(jìn)行密封性能測試。

產(chǎn)品在生產(chǎn)過程中會經(jīng)過密封性測試全檢，保證每個細(xì)胞工廠都擁有良好的密封性能。

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