眾所周知，哺乳動物細胞作為蛋白的表達系統(tǒng)具有糖基化、乙?；?、硫酸化、硫酸化等翻譯后修飾。而蛋白翻譯后修飾，如糖基化修飾，會直接影響蛋白在體內(nèi)的半衰期及穩(wěn)定性和生物學活性、影響配體識別及結(jié)合，影響其免疫原性，影響胞間作用等等功能。

目前，哺乳動物細胞已被廣泛用于重組蛋白、疫苗、抗癌試劑及其他臨床相關的藥物的生產(chǎn)中。

CHO細胞、BHK細胞、Sp2/0等細胞常被用于制備生物制藥。然而這些小鼠來源的細胞與HEK293細胞相比，缺乏人的細胞翻譯后修飾系統(tǒng)，因此與人源系統(tǒng)表達的蛋白有差異。目前，HEK293細胞被廣泛用于生產(chǎn)蛋白、疫苗、抗癌試劑及重組腺病毒包被等。

HEK293細胞特點

對于做分子生物學實驗的人來說，HEK293細胞再熟悉不過了。常在文獻中看到不同的HEK293名字，HEK293細胞極少表達細胞外配體所需的內(nèi)生受體，且比較容易轉(zhuǎn)染，是一個很常用的表達研究外源基因的細胞株。HEK293細胞的一個衍生株：293T/17的轉(zhuǎn)染效率更高，成為廣大研究者研究基因功能的一個強大工具。

HEK293細胞特點(1)?轉(zhuǎn)染效率高(2)?可懸浮培養(yǎng)用于大規(guī)模表達(3)?表達蛋白結(jié)構(gòu)最接近其在人體內(nèi)構(gòu)象(4) HEK293細胞在培養(yǎng)體系中能夠快速增長，高密度培養(yǎng)

(5) HEK293細胞與神經(jīng)元細胞一樣，對外界微環(huán)境較為敏感，利用這一特點，可用于藥物發(fā)現(xiàn)及細胞毒性測試

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HEK293細胞系的發(fā)展

1973年，最原始的HEK293細胞來原于一個夭折的人類胚胎腎細胞中，將人的胚胎腎細胞中的轉(zhuǎn)化入人5型腺病毒DNA片段，得到的細胞即為HEK293細胞。目前,HEK293細胞用途非常廣泛，常用于生產(chǎn)蛋白、疫苗、抗試齊及重組腺病毒包裝等。

HEK293細胞家族譜系

293T細胞

293細胞中轉(zhuǎn)入SV40T-antigen基因形成的高轉(zhuǎn)衍生株，即為293T細胞系。這使得包含SV40ori的質(zhì)粒能夠在該細胞系中顯著擴增，從而促進表達載體的擴增，促進蛋白的表達。

293T細胞除了可用于各類基因表達及蛋白生產(chǎn)，還可用于高滴度逆轉(zhuǎn)錄病毒及其他病毒生產(chǎn)，如腺病毒及其他哺乳動物病毒。

293T/17細胞

293T細胞中共轉(zhuǎn)染入pBND 和 pZAP 質(zhì)粒，獲得的具有G418耐受的細胞系即為293T/17細胞系。該細胞系在保有293T細胞的優(yōu)良性能之外，還具有高轉(zhuǎn)染性的特點。

293T/17 SF細胞

293T/17 SF細胞系指的是在293T細胞中轉(zhuǎn)入EBV基因形成的轉(zhuǎn)化細胞系，該細胞系主要用于細胞的瞬時轉(zhuǎn)染及蛋白表達。

293H細胞

293H細胞則指的是將293細胞馴化后得到的能夠在無血清培養(yǎng)體系下快速生長、具有高轉(zhuǎn)染效率及高效蛋白表達性能的細胞系。另外，該細胞系貼附力好，而被用于噬菌斑檢測等應用。

293E細胞

293E細胞指的是在293-H細胞中插入EBNA-1基因的細胞系，該基因能夠穩(wěn)定表達EBV病毒的EBNA1蛋白。含有EBV復制起點（oriP）的重組表達質(zhì)粒，能夠在H293E細胞中復制，并實現(xiàn)蛋白的高效表達。

293-6E細胞

293-6E細胞則是在293-H細胞中插入截短過后的EBNA-1基因的細胞系，其能夠在無血清培養(yǎng)基中高表達生產(chǎn)蛋白及病毒載體。

293F細胞

293F細胞是一類能夠在無血清中高表達蛋白的野生型293細胞系。

293FT細胞

293FT細胞則是在293F細胞系中插入pCMVSPORT6TAg.Neo 質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化細胞系，能夠快速增值，易轉(zhuǎn)染，其能夠用于慢病毒載體的生產(chǎn)。

293FTM細胞

293FTM細胞則是來源于Flp-InTMT-RETM293細胞，該細胞系中轉(zhuǎn)染了ecotropic receptor質(zhì)粒及MAPPIT(mammalian protein-protein interaction trap)報告質(zhì)粒，該細胞系主要用于蛋白互作的篩選。

293S細胞

293S細胞則指的被馴化成能夠懸浮培養(yǎng)且能夠耐受低鈣離子培養(yǎng)條件的293細胞系。

293SG細胞

將293S細胞用甲基磺酸乙酯誘變處理，蓖麻毒素選擇后再轉(zhuǎn)染pcDNA6/TR質(zhì)粒得到耐受蓖麻毒素的細胞系即為293SG。該細胞系缺乏乙酰氨基葡萄糖轉(zhuǎn)移酶I活性，因此可促進蛋白的Man5GlcNAc2N-聚糖型糖基化修飾。此外，該細胞系中具有四環(huán)素表達抑制基因，可用于四環(huán)素誘導的蛋白表達研究。這類細胞系常用于同源的N-糖基化蛋白的表達。
293SGGD細胞293SGGD細胞系則指的是在293SG轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-zeo-STendoT質(zhì)粒的細胞系，其主要用于糖基化工程研究中。

參考文獻："Xie QW, et al. Complementation analysis of mutants of nitric oxide synthase reveals that the active site requires two hemes. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93: 4891-4896, 1996. PubMed: 8643499Da Costa LT, et al. Converting cancer genes into killer genes. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93: 4192-4196, 1996. PubMed: 8633039Graham FL, et al. Characteristics of a human cell line transformed by DNA from human adenovirus type 5. J. Gen. Virol. 36: 59-72, 1977. PubMed: 886304Graham FL, et al. Defective transforming capacity of adenovirus type 5 host-range mutants. Virology 86: 10-21, 1978. PubMed: 664220Harrison T, et al. Host-range mutants of adenovirus type 5 defective for growth in HeLa cells. Virology 77: 319-329, 1977. PubMed: 841862Bodary SC, McLean JW. The integrin beta 1 subunit associates with the vitronectin receptor alpha v subunit to form a novel vitronectin receptor in a human embryonic kidney cell line. J. Biol. Chem. 265: 5938-5941, 1990. PubMed: 1690718Goodrum FD, Ornelles DA. The early region 1B 55-kilodalton oncoprotein of adenovirus relieves growth restrictions imposed on viral replication by the cell cycle. J. Virol. 71: 548-561, 1997. PubMed: 8985383"

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