注：可能存在不準(zhǔn)確情況，配套本人已投稿視頻進(jìn)行觀看?

對于組成細(xì)胞的主要分子類型，包括蛋白質(zhì)、碳水化合物、脂質(zhì)、核酸等進(jìn)行了介紹。介紹了PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)中如何檢驗(yàn)PCR反應(yīng)是否成功，通過做瓊脂糖凝膠電泳來檢測DNA是否存在。介紹了瓊脂糖凝膠電泳的制備方法，以及通過觀察瓊脂糖凝膠電泳的孔洞得出DNA是否存在的結(jié)論。講解了組成蛋白質(zhì)的氨基酸中有些帶正電荷，有些帶負(fù)電荷，蛋白質(zhì)本身也可以帶有正電荷或負(fù)電荷，這對于后續(xù)蛋白質(zhì)分析方法的選擇有所幫助。

介紹了不同的分析方法，包括電泳、光譜法、質(zhì)譜法等，這些方法都是依據(jù)分子的性質(zhì)和特點(diǎn)來進(jìn)行分析的。講述了如何進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳（Agarose Gel Electrophoresis）實(shí)驗(yàn)，以檢測PCR反應(yīng)產(chǎn)物的大小。首先，在凝膠的頂部分成稱為“l(fā)anes”的小槽，將待檢測的DNA樣品放入其中。然后，通過給凝膠加電，使DNA樣品在凝膠中移動，根據(jù)DNA分子大小的不同，會在凝膠上出現(xiàn)不同的分離帶。為了可視化這些分離帶，需要加入一種熒光染料（如溴化乙錠），并在紫外線下觀察凝膠。通過比較DNA分子大小標(biāo)準(zhǔn)品（ladder）和PCR反應(yīng)產(chǎn)物的大小，可以確定PCR反應(yīng)是否成功，以及反應(yīng)產(chǎn)物的大小。此外，為了確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，還需要進(jìn)行一些控制實(shí)驗(yàn)，例如檢測DNA模板是否完好等。關(guān)于PCR實(shí)驗(yàn)和Agarose gel的應(yīng)用。實(shí)驗(yàn)中使用兩組引物來檢測病原體，并運(yùn)行陽性和陰性對照，以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確。在Agarose gel中，檢測到的DNA條帶可用于判斷樣本是否感染了病原體。此外，討論了plasmid的分析和常用的酶切方法。實(shí)驗(yàn)中需要注意控制實(shí)驗(yàn)，包括陽性和陰性對照。限制性內(nèi)切酶是一種重要的酶，可以切割DNA，但僅在特定的序列上切割。這些酶來自細(xì)菌。講了病毒如何通過注入基因組到細(xì)胞內(nèi)制造更多病毒來感染細(xì)胞，以及細(xì)菌如何進(jìn)化出限制酶系統(tǒng)來抵御病毒的感染。在生物技術(shù)中，我們利用限制酶來構(gòu)建質(zhì)粒。此外，還討論了瓊脂糖凝膠電泳的原理和濃度選擇，以及熒光原位雜交技術(shù)（FISH）的應(yīng)用。FISH是一種顯微鏡技術(shù)，可以告訴我們核酸的定位。講解了Fluorescence in situ hybridization (FISH)技術(shù)的應(yīng)用和原理。FISH技術(shù)通常用于探究共生體在宿主體內(nèi)的分布、基因在染色體上的位置以及mRNA的局部化等方面。該技術(shù)利用具有熒光標(biāo)記的探針與目標(biāo)核酸的互補(bǔ)配對，通過顯微鏡觀察標(biāo)記的熒光信號來確定目標(biāo)核酸的位置。FISH技術(shù)的主要缺點(diǎn)是需要破壞細(xì)胞膜以使探針進(jìn)入細(xì)胞，因此需要犧牲細(xì)胞。

主要討論了分子生物學(xué)中的一些概念和技術(shù)，包括同義詞、原位雜交（fish）、引物（primer）、限制性內(nèi)切酶（restriction enzyme）、環(huán)狀DNA（plasmid）、測序（sequencing）等。其中，對原位雜交的解釋是指特定引物或探針與樣品中的靶DNA序列結(jié)合，從而檢測出該序列的位置和數(shù)量；引物和探針的區(qū)別在于前者用于PCR反應(yīng)，后者則用于原位雜交；限制性內(nèi)切酶可將DNA切割成特定的片段用于克隆，但若兩端的限制性內(nèi)切酶切口相互匹配，則可能會導(dǎo)致環(huán)狀DNA的重合；測序可分為Sanger測序和下一代測序，前者適用于對單一模板進(jìn)行測序，后者適用于對大量模板同時進(jìn)行測序。Sanger測序的原理是利用缺氧去氧核苷酸（ddNTPs）阻礙DNA鏈的延伸，從而讀取DNA序列。Sanger測序是一種測序DNA的方法，通過PCR反應(yīng)擴(kuò)增DNA的片段，然后通過一系列步驟，包括使用特殊的ddNTPs、尺寸排除柱、激光掃描等方式來測序DNA。Sanger測序生成的數(shù)據(jù)包括一個文本文件和一個色譜圖。色譜圖中，峰值的高度代表著DNA序列的強(qiáng)度，而出現(xiàn)多個峰值的情況說明該樣本是雜合的。Sanger測序技術(shù)的優(yōu)勢在于其可靠性和準(zhǔn)確性，但其測序長度有限，一般在1000bp以內(nèi)。

講述了核酸和蛋白質(zhì)的研究方法。其中，核酸的研究方法包括瓊脂糖凝膠電泳、FISH、Sanger測序和二代測序；蛋白質(zhì)的研究方法包括SDS-PAGE和Western Blot。在SDS-PAGE中，使用聚丙烯酰胺凝膠和SDS等試劑將蛋白質(zhì)變性并分離，通過電泳可得到不同大小的蛋白帶；而Western Blot是SDS-PAGE的加強(qiáng)版，可以使用特異性抗體檢測所需的蛋白質(zhì)。需要注意的是，SDS-PAGE并不能告訴你具體的蛋白質(zhì)是什么，需要通過LC-MS/MS等進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)確定；而Western Blot可以檢測到特定的蛋白質(zhì)。SDS-PAGE是一種蛋白質(zhì)分離的方法，可以用來檢測不同樣品中蛋白質(zhì)之間的差異。Western blot是一種檢測特定蛋白質(zhì)的方法，適用于已知蛋白質(zhì)名稱并能夠找到對應(yīng)抗體的情況。Western blot的步驟包括：1）進(jìn)行SDS-PAGE；2）將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到膜上；3）加入一種主抗體，使其識別并結(jié)合目標(biāo)蛋白質(zhì)；4）加入一種次抗體，使其結(jié)合主抗體并產(chǎn)生信號?？贵w是免疫系統(tǒng)的一部分，可以識別和結(jié)合到病原體表面的蛋白質(zhì)，從而幫助身體識別和消滅病原體。Western blot的結(jié)果通常用抗體名稱標(biāo)記，并且可以確定哪個樣品中含有目標(biāo)蛋白質(zhì)。在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中需要考慮的因素，例如實(shí)驗(yàn)成本、靈敏度、實(shí)驗(yàn)周期等。接著，提到了兩個檢測樣本中微生物存在的實(shí)驗(yàn)場景，討論了如何在沒有基因組信息的情況下設(shè)計(jì)PCR引物，以及如何選擇PCR擴(kuò)增的目標(biāo)基因。研究對象是細(xì)菌的核糖體基因，這些基因是高度保守的，如果突變會導(dǎo)致細(xì)胞死亡，因此選擇這些基因作為研究對象。可以通過多個相關(guān)基因組進(jìn)行比對，找到高度保守的區(qū)域，然后設(shè)計(jì)PCR引物。在檢測質(zhì)粒是否含有插入物時，可以選擇使用瓊脂糖凝膠電泳的方法，以質(zhì)粒本身作為陰性對照。

關(guān)于實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析及結(jié)果判讀的討論。以下：實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析需要多個實(shí)驗(yàn)的支持，以提高結(jié)果的可信度。在凝膠電泳實(shí)驗(yàn)中，通過觀察DNA條帶的數(shù)量和大小，可以判斷DNA的形態(tài)和大小。如果實(shí)驗(yàn)成功，DNA條帶應(yīng)該比陰性對照還要大，出現(xiàn)“上移”的現(xiàn)象。通過測序和限制性酶切分析等多種方法，可以進(jìn)一步驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的正確性。多個實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致可以提高結(jié)果的可信度，讓實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)更具有說服力。在科研中，要盡可能做多個實(shí)驗(yàn)，以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

確定未知基因的功能是分子生物學(xué)研究中常見的問題。有幾種實(shí)驗(yàn)技術(shù)可用于確定未知基因的功能。一種方法是使用基因敲除或基因沉默技術(shù)來觀察對細(xì)胞過程或表型的影響。另一種方法是使用生物信息學(xué)，根據(jù)未知基因的序列和同源性預(yù)測其功能。此外，可以在不同條件下分析基因表達(dá)或蛋白質(zhì)水平，以獲得有關(guān)其功能的見解。功能測定，如酶測定或蛋白質(zhì)相互作用測定，也可用于確定基因產(chǎn)物的生化功能。

討論了如何研究一個基因的功能。Blast算法是用于比對基因序列并推測其功能的一種方法。對于研究基因的功能，可以通過突變基因并觀察表型變化的方法來進(jìn)行反向遺傳學(xué)研究。對于研究蛋白質(zhì)的功能，可以通過制備抗體并進(jìn)行免疫熒光實(shí)驗(yàn)來確定其位置，從而推測其功能。表達(dá)基因并制備蛋白質(zhì)是研究蛋白質(zhì)功能的重要手段。研究一個基因的功能需要進(jìn)行多個實(shí)驗(yàn)，形成一個完整的實(shí)驗(yàn)流程，最終推斷其功能。還有其他方法可以用于研究基因和蛋白質(zhì)的功能，例如研究轉(zhuǎn)錄本表達(dá)等。