? ? ? ?AAV載體在體外實驗中用于感染培養(yǎng)細(xì)胞時，常發(fā)現(xiàn)其表達(dá)水平較低，而且有表達(dá)延遲現(xiàn)象。這是因為AAV基因組是單鏈的，它進(jìn)入細(xì)胞以后，必須要有一個由單鏈變?yōu)殡p鏈的過程，然后其所攜帶的外源基因才能進(jìn)行轉(zhuǎn)錄和翻譯，在沒有輔助病毒或其它輔助因子的情況下，這種AAV由單鏈DNA在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制形成雙鏈DNA的過程是十分緩慢的，因此相對于其它雙鏈DNA病毒載體如單純皰疹病毒（HSV）和腺病毒（Ad），其表達(dá)明顯延后。此外，AAV對細(xì)胞毒性低，培養(yǎng)的細(xì)胞在加入AAV后，細(xì)胞分裂生長能力不受太大的影響，這樣也對AAV載體有一種稀釋作用，也導(dǎo)致其表觀表達(dá)水平較低。而在體內(nèi)應(yīng)用時，注射部位的組織細(xì)胞通常沒有顯著增殖，不會出現(xiàn)AAV載體被稀釋的情況，而且在體內(nèi)各種促進(jìn)AAV載體所攜帶外源基因表達(dá)的各種因子相對豐富，故體內(nèi)應(yīng)用時，AAV載體的表達(dá)水平比較高。研究表明輔助病毒或其它輔助因子可以明顯促進(jìn)單鏈DNA復(fù)制成雙鏈DNA，從而明顯提高外源基因的表達(dá)水平，故在體外應(yīng)用可以考慮加入輔助病毒（Ad5）或丁酸鈉（終濃度10~50mmol/L），這樣可以提高表達(dá)水平達(dá)5~10倍。