實驗室蛋白原液中的聚丙二醇消泡劑殘留檢測方法研究
蛋白原液是微生物、細胞工程、生物制品等研發(fā)中不可缺少的原材料。在蛋白原液提取過程中,會加入各種不同的消泡劑,以減少蛋白原液中的泡沫,從而降低蛋白的發(fā)泡程度。但是消泡劑往往具有較強的揮發(fā)性、擴散性等特點,易與蛋白質(zhì)分子結(jié)合,從而引起蛋白發(fā)泡和絮凝。
如果不及時進行洗脫或者處理的話很容易造成蛋白質(zhì)絮凝、降解、變性等現(xiàn)象,嚴重影響產(chǎn)品質(zhì)量。因此需要對消泡劑殘留進行檢測以確保產(chǎn)品質(zhì)量。消泡劑的主要成分是表面活性劑類物質(zhì),包括非離子、兩性、非兩性等,能夠使蛋白質(zhì)分子表面形成親水性親水層膜,從而起到消泡和抑泡的作用。
聚丙二醇消泡劑是一款以聚醚為主要原料通過工藝處理加工復(fù)配而成消泡劑,可以有效清除各個行業(yè)中存在的難除型泡沫,具有長時間抑泡性能,加入后不輕易發(fā)生二次起泡問題。在高溫高壓、強酸強堿下也可以持續(xù)地完成消泡、抑泡處理。很小添加量便可達到令人滿意的消泡效果,加入后不會影響原材料的基本性質(zhì),也不會影響其他化學(xué)助劑的使用。實驗室以聚丙二醇消泡劑為例,介紹實驗室消泡劑殘留的檢測方法。
聚丙二醇消泡劑消泡效果優(yōu)異,安全性好,當(dāng)應(yīng)用多肽藥物的生產(chǎn)時,聚丙二醇的毒性非常低,是生物制藥領(lǐng)域應(yīng)用較多的一種原液消泡劑。實驗室可根據(jù)樣品情況選擇利用高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法進行殘留檢測,通過定量定性的方式來分析樣品中消泡劑殘留量。實驗條件選擇C18色譜柱,柱溫為35℃,0.1%甲酸水溶液為流動相A、以甲醇為流動相B,質(zhì)譜檢測器,離子源為ESI,正離子模式進行檢測。
以對照品溶液的濃度為橫坐標(biāo),對照品溶液的峰面積為縱坐標(biāo),制作標(biāo)準曲線,得到對照品溶液的標(biāo)準曲線,通過外標(biāo)法反映計算樣品中的消泡劑殘留量。該檢測方法專屬性、線性及相關(guān)性、重復(fù)性、準確度、耐用性等驗證確定方法的可靠性和準確性,靈敏度高重復(fù)性好。操作人員可根據(jù)不同類型樣品,制定相應(yīng)的的檢測方案方法,確保最終的檢測結(jié)果數(shù)據(jù)的科學(xué)性。
蛋白原液中消泡劑殘留檢測范圍廣,包括丙二醇、乙醇、異丙醇、甘油、硫代乙酰胺等,如加工過程中含有大量消泡劑殘留,會對產(chǎn)品質(zhì)量產(chǎn)生一定影響。微源實驗室優(yōu)勢項目消泡劑殘留檢測,能夠?qū)悠分邢輨埩暨M行檢測并提供方法驗證,為后續(xù)生產(chǎn)提供質(zhì)量控制,可對制藥與生物制藥、食品、化工及環(huán)境等方面中的消泡劑殘留檢測中有所應(yīng)用。
實驗室擁有氣相色譜、液相色譜、高分辨液質(zhì)、液質(zhì)三重四級桿、氣質(zhì)質(zhì)、掃描電鏡、透射電鏡、核磁、二次離子質(zhì)譜等多類專業(yè)檢測設(shè)備儀器,實驗室遵照ISO17025和GMP等高標(biāo)準進行管理,可對工藝中添加的消泡劑/PEG/PEI/MSX/泊洛沙姆/抗生素/吐溫等進行檢測,對于由原料引入的雜質(zhì)及可能的降解產(chǎn)物進行科學(xué)合理評估。
*部分圖片來源自網(wǎng)絡(luò),如有侵權(quán)請聯(lián)系刪除。