OLINK蛋白檢測(cè)服務(wù)樣本準(zhǔn)備指南(組織)
對(duì)血清和血漿樣本,Olink 進(jìn)行了充分的優(yōu)化與驗(yàn)證,故不再需要預(yù)實(shí)驗(yàn)。
除此之外的其他樣本類型(非標(biāo)樣本),蛋白質(zhì)組成及含量參差不同,進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)可以確保在最佳條件下分析樣本,保障檢測(cè)指標(biāo)在有效的動(dòng)態(tài)及線性范圍內(nèi),以及排除有可能存在的過飽和風(fēng)險(xiǎn)。因此我們強(qiáng)烈建議非標(biāo)樣本都需進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn):
Olink 建議的預(yù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括:
至少選擇6-12個(gè)樣本(即每個(gè)組別分別選取3-6個(gè)樣本)
樣本的選擇應(yīng)涵蓋新基質(zhì)的整個(gè)范圍(例如:病例和對(duì)照組,不同的處理?xiàng)l件)。
如果您預(yù)期樣品間的差異很大(例如,組織培養(yǎng)反應(yīng)的高可變性、擴(kuò)展的樣品處理?xiàng)l件或樣品濃度),則應(yīng)增加預(yù)實(shí)驗(yàn)中分析的樣品數(shù)量,并應(yīng)包括額外的樣品,以確定方法學(xué)中的變異性。這將幫助指導(dǎo)后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
每個(gè)樣品應(yīng)至少用3個(gè)稀釋梯度進(jìn)行測(cè)試(由實(shí)驗(yàn)室根據(jù)panel指標(biāo)特性確定操作)
我們的panel開發(fā)充分考慮到血漿和血清中的蛋白組成和濃度跨度。應(yīng)該使用什么稀釋度取決于客戶感興趣的靶點(diǎn)蛋白以及濃度,根據(jù)驗(yàn)證數(shù)據(jù)中的分析測(cè)量范圍進(jìn)行確認(rèn)。
我們的支持團(tuán)隊(duì)可以根據(jù)您對(duì)基質(zhì)中蛋白質(zhì)濃度的預(yù)期和所選擇的panel,幫助您選擇最合適的稀釋度。
如果您正在分析組織培養(yǎng)樣本,并懷疑不同樣品之間存在高可變性(即細(xì)胞分化), 那么您應(yīng)該測(cè)試重復(fù)樣本,以確定方法中的可變性。
一旦您對(duì)預(yù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)滿意,則使用最優(yōu)稀釋開展所有樣品正式實(shí)驗(yàn)。
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