慢性支氣管炎(chronic bronchitis，CB)是一種十分常見的慢性炎癥，集中發(fā)作于氣管、支氣管黏膜及周圍組織。選用模型動物并選擇性排除干擾因素能夠更直觀地了解其發(fā)病因素、病理特征和發(fā)病機制，對后期的臨床研究及新藥的開發(fā)提供重要材料。

動物的選擇

考慮到實驗動物的繁殖周期、實驗成本、動物基因組研究進程等多種因素，大鼠、小鼠、豚鼠等廣泛應(yīng)用于CB模型。

造模方法

一、煙熏法

煙熏法多以單一煙絲或混合煙霧材料(如煙葉、鋸末、刨花各50g)為刺激物置于特制煙室制備CB模型。

造模方法：選用大鼠或小鼠作為實驗動物，30～50min/次，2～4次/d，持續(xù)28～60d。

結(jié)果顯示模型組小鼠氣道上皮出現(xiàn)大量炎細胞浸潤，腺體分泌功能亢進，有黏液栓形成，肺泡灌洗液中白細胞總數(shù)和中性粒細胞數(shù)量明顯增加，蛋白含量上調(diào)，血漿和肺組織勻漿的超氧化物歧化酶活性和總抗氧化能力降低，丙二醛( MDA) 含量增加。

優(yōu)點：煙熏法致CB模型的建立呈漸進性發(fā)展，簡便可靠，炎癥病變確切，有助于研究CB發(fā)生發(fā)展過程中各階段的病理變化以及相應(yīng)炎細胞浸潤及炎性標志物的變化，為臨床早期診斷和治療提供理論依據(jù)。

缺點：致煙劑原料種類單一，其燃燒產(chǎn)生的煙霧濃度難以控制，且實驗周期較長，穩(wěn)定性較差。

二、化學(xué)藥物法

多種化學(xué)藥物能夠引發(fā)CB，常見的藥物有二氧化硫、氯氣、氨水和脂多糖(LPS)。

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二氧化硫吸入法

造模方法：選用大鼠及小鼠作為實驗對象，將不同濃度的二氧化硫置于玻璃鐘罩或者特制熏箱，將實驗動物分批放入進行10s～30min熏制，1次/d，全程 15～28d。

優(yōu)缺點：本方法能夠引起CB的病理變化，病情發(fā)展嚴重后甚至導(dǎo)致氣流阻塞并發(fā)肺氣腫。本方法快速簡易，但對氣管及支氣管的刺激性較大，過量的二氧化硫會引起呼吸道黏膜燒灼傷，上皮細胞增生壞死，容易導(dǎo)致動物模型發(fā)生急性損傷甚至死亡，故選用合適的濃度以及建立過程，使氣道損傷程度適中尤為重要。

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氨水霧化法

造模方法：選取小鼠作為實驗對象，2min/次，每次間隔0.5h，5次/d，連續(xù)10d，10d后采用氨水霧化2min/次，每次間隔0.5h，2次/d，連續(xù)20d，全程總共30d。

模型組咳嗽次數(shù)明顯增加、支氣管黏膜上皮細胞空泡變性增生、細支氣管皺縮、炎性細胞浸潤、纖毛發(fā)生倒伏脫失、部分肺泡隔斷裂成肺大泡、管腔大量漿液滲出及肺間質(zhì)血管擴張淤血。

優(yōu)缺點：本方法簡便易行，但在實施過程中污染較大。

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氯氣吸入法

暴露于低濃度的氯會優(yōu)先對大呼吸道造成損害，而對肺泡損害較弱，從而造成廣泛氣道損害。高濃度的氯(800g/m3、5min) 會直接導(dǎo)致呼吸道和肺泡雙重損傷進而導(dǎo)致急性氣道炎癥反應(yīng)的發(fā)生。由于氧化應(yīng)激標志物的發(fā)現(xiàn)以及低分子量抗氧化劑對異常情況的緩解，進而證明氯氣對氣道造成的損害本質(zhì)上是氧化性的。

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LPS注射法

LPS是蛋白質(zhì)、類脂質(zhì)及多糖的復(fù)合物，也是重要的致炎因子，可引起氣道上皮損傷，激活炎性細胞并釋放炎性因子，誘導(dǎo)氣道炎癥。

造模方法：選用小鼠或大鼠作為實驗對象，采用氣管滴注等方法制備CB動物模型。

優(yōu)缺點：本方法簡單經(jīng)濟、易定量、耗時短且污染較少。由于LPS注射法具有足夠的刺激強度，同時又考慮到人類CB的發(fā)病機制，故可成功復(fù)制出CB的動物模型。其缺點是LPS過量會導(dǎo)致急性肺損傷改變，不利于CB的階段性觀察，故前期造模條件的摸索尤為重要。

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甲醛刺激法

造模方法：有研究者選用20%的甲醛(10mL)刺激模型組小鼠1h，連續(xù)刺激30d的方法復(fù)制CB 模型。自第10天起，該模型中小鼠的氣管及支氣管黏膜出現(xiàn)輕度充血水腫、杯狀細胞輕微增生、炎性細胞浸潤及肺間質(zhì)輕度充血。隨造模時間延長，小鼠體質(zhì)量日益減輕，同時炎癥逐漸加重。自20d起，部分上皮鱗狀化生明顯，較大支氣管出現(xiàn)不同程度的炎性細胞浸潤。直至第30d，黏膜充血明顯，中、小支氣管黏膜上皮細胞出現(xiàn)灶性變性壞死、脫落，杯狀細胞大量增生，大量黏液分泌及分泌物增加。

優(yōu)缺點：優(yōu)點是裝置和操作簡單，成本較低，實際應(yīng)用較為方便。缺點為甲醛易揮發(fā)，污染環(huán)境。

總結(jié)

由于實驗動物與人類的氣道存在解剖學(xué)、炎癥或纖維化上的差異，上述造模方法皆不能完全模擬CB病理特點，需在造模方法、試劑用量以及頻率等方面反復(fù)推敲，對比并分析各方法結(jié)果的差異，不斷完善CB模型的研究，同時對于其他新型造模方法的建立進行進一步的研究和探索。