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外泌體偶聯(lián)轉(zhuǎn)鐵蛋白超順磁納米粒子/功能化串晶結(jié)構(gòu)納米纖維膜/載外泌體納米紗復(fù)合支架

2022-05-05 17:47 作者:瑞禧生物小曉  | 我要投稿

今天瑞禧生物小編給大家整理分享的是外泌體偶聯(lián)轉(zhuǎn)鐵蛋白超順磁納米粒子/功能化串晶結(jié)構(gòu)納米纖維膜/負(fù)載外泌體納米紗復(fù)合支架的研究制備,來看!

為提高合成可吸收引導(dǎo)骨再生膜的骨誘導(dǎo)活性,通過靜電紡絲和溶劑誘導(dǎo)結(jié)晶法制備了聚己內(nèi)酯(PCL)/β-磷酸三鈣(β-TCP)串晶納米纖維膜﹐并通過聚多巴胺的黏附作用將外泌體負(fù)載于纖維膜上進(jìn)行改性,對復(fù)合纖維膜的微觀形貌﹑化學(xué)組成、理化性能和細(xì)胞成骨分化性能進(jìn)行測試與分析。結(jié)果表明:PCL/B-TCP納米纖維上成功誘導(dǎo)出串晶結(jié)構(gòu),且經(jīng)串晶和聚多巴胺雙重修飾的纖維膜具有最佳的表面浸潤性和優(yōu)異的蛋白吸附能力,最終獲得的外泌體功能化的串晶納米纖維膜在串晶結(jié)構(gòu)、聚多巴胺和外泌體共同作用下可促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞堿性磷酸酶活性的增加,有望應(yīng)用于體內(nèi)加速骨愈合。

外泌體功能化串晶結(jié)構(gòu)納米纖維膜的制備方法:

首先,將PCL顆粒加入至CF和 DMF(二者體積比為3∶1)中配制成質(zhì)量濃度為0.12 g/mL的PCL溶液;向PCL溶液中加入B-TCP(占PCL質(zhì)量的5%),超聲波處理1 h使β-TCP充分分散;在磁力攪拌下形成均勻混合的紡絲液。將上述紡絲液轉(zhuǎn)移至裝有19G針頭的10 mL注射器中在靜電紡絲機(jī)上進(jìn)行紡絲。紡絲電壓為15 kV,推注速度為1.2 mL/h,紡絲距離為15 cm。將所得靜電紡絲纖維膜置于37℃真空干燥箱中干燥24 h以充分去除殘留有機(jī)溶劑,將該纖維膜記為PT5。

然后﹐采用溶劑誘導(dǎo)結(jié)晶法在納米纖維表面制備串晶結(jié)構(gòu)。將PCL顆粒溶于乙酸戊酯中配制0.01 glmL的PCL稀溶液﹐在60 ℃溫度下磁力攪拌2 h,冷卻至室溫后滴加于PT5纖維膜上過夜使溶劑自然揮發(fā),得到具有串晶結(jié)構(gòu)的纖維膜,記為PT5SK。

最后,將制備的PT5和PT5SK靜電紡纖維膜分別浸入2 mg/mL的鹽酸多巴胺和 10 mmol/L Tris-HCl(pH 值為8.5)中,并在37℃和60 r/min搖床中孵育12 h;之后將纖維膜用去離子水超聲波清洗多次至水不變色,然后于37℃真空干燥24 h,所得樣品分別記為PT5/PDA 和 PT5SK/PDA。

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