鏈霉素毒性反應與氯化鈣的對抗作用
一、實驗目的? 通過實驗,學習測定藥物LD50的方法、步驟和計算方法,了解急性毒性試驗的常規(guī)方法。 二、實驗原理? 半數(shù)致死量(lethal dose 50%, LD50):是指能夠引起試驗動物一半死亡的藥物劑量,通常用藥物致死劑量的對數(shù)值表示。LD50及相應置信區(qū)間是由劑量-反應模型得出的最常用的統(tǒng)計量。新藥急性毒性試驗的LD50測定是臨床前安全評價的重要內容,也是各類藥品(化學、中藥和生物制品)注冊時必需申報的資料。LD50的測定方法很多,如:目測機率單位法、機率單位加權回歸法(Bliss法)、寇氏法(Karber法)及序貫法等,其中Bliss法是目前推薦使用的方法。我國衛(wèi)生部規(guī)定,Bliss法是作為新藥LD50測定評定必須采用的方法。? 三、實驗材料? 1.1.器材:電子天平 2.2.試劑:硫酸鎂溶液。 3.3.動物:小白鼠。 四、實驗步驟?? 1、預試驗?取小鼠8只,以2只為一組分成4組,選擇組距較大的一系列劑量,分別按組腹腔注硫酸鎂溶液,觀察出現(xiàn)的癥狀并記錄死亡數(shù),找出引起0%死亡率和100%死亡率劑量的所在范圍(至少應找出引起20%~80%死亡率)。(參考劑量:LD100為1.2g/kg, LD 0為 0.7g/kg)。? 2、正式試驗??在預初驗所獲得的0%和100%致死量的范圍內,選用6個劑量(1.2 g/kg 、1.1g/kg 、1g/kg 、0.9g/kg 、0.8g/kg、0.7g/kg),每組8只小鼠,動物的體重和性別要均勻分配,完成動物分組和劑量計算后按腹腔注射給藥。 3、LD50測定中應觀察紀錄的項目 ⑴?實驗要素:藥物的批號,動物品系,來源,性別,體重,給藥方式及劑量、給藥時間等。 ⑵ 給藥后各種反應:潛伏期,中毒現(xiàn)象,開始出現(xiàn)死亡的時間,死前的現(xiàn)象,各組死亡的只數(shù)等。 ?4、結果計算?實驗完畢后,清點各組死亡鼠數(shù)和算出死亡率(P),使用SPSS軟件進行機率單位加權回歸法(Bliss法)計算LD50。