本產(chǎn)品為抗小鼠各個亞類及輕鏈特異性HRP標記抗體組合套裝，用于鑒定細胞上清及腹水中單抗的亞型，使用者需要具備一定的ELISA操作技能和免疫學(xué)知識；否則，請購買本公司成品試劑盒。

產(chǎn)品特點：

本套裝試劑特點:高靈敏度、高特異性、無交叉反應(yīng)，檢測樣品范圍廣泛結(jié)果容易判定。當然您如果覺得很多試劑要自己準備很麻煩那您可以登陸網(wǎng)站選擇我們?yōu)槟鷾蕚涞恼自噭┖挟a(chǎn)品。

保存條件：

-20℃避光保存效期不少于3年，過于在強光或不良環(huán)境中頻繁開啟管蓋有可能因此使效期縮短。

組成成分：

Goat Anti-Mouse IgG1?（HRP conjugated）? ? ? ? ? 100ul

Goat Anti-Mouse IgG2a?（HRP conjugated）? ? ? ? ?100ul

Goat Anti-Mouse IgG2b?（HRP conjugated）? ? ? ? ?100ul

Goat Anti-Mouse IgG3?（HRP conjugated）? ? ? ? ? 100ul

Goat Anti-Mouse IgM?（HRP conjugated）? ? ? ? ? ?100ul

Goat Anti-Mouse IgA?（HRP conjugated）? ? ? ? ? ?100ul

本套裝含有各1支共計6支，液體除含有酶標記物外還含有PBS、甘油、防腐劑和穩(wěn)定劑,每支體積100μL。

使用范圍：

用于鑒定細胞上清及腹水中小鼠單克隆抗體Ig類、亞類\亞型的鑒定以及相關(guān)內(nèi)容的研究。

使用方法：

1.將抗原（待鑒定單克隆抗體亞型對應(yīng)的抗原）用適當?shù)木彌_液（CBS或PBS緩沖液）包被酶標微孔板，包被濃度在1ug/mL左右，置37℃溫育2小時或4℃放置 12小時，隨后用PBS-T洗一遍。含1% BSA的PBS-T封閉，每孔150ul,室溫2小時，拍干；

2.將待測雜交瘤細胞株培養(yǎng)上清或用PBS-T稀釋的單抗腹水（建議稀釋1000倍）每株加6孔每孔100μl，置37℃溫育30分；

3.溫育結(jié)束后，用PBS-T洗5遍，將本產(chǎn)套裝的6種酶標記物用含有0.5%BSA的PBS-T按1：1000稀釋后每種加1孔，每孔100μl共6孔，置37℃溫育30分；

4.用PBS-T洗5遍，隨后加TMB顯色液37℃避光顯色20分鐘即可判定結(jié)果。

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本酶特異性很好一般本底極低，肉眼觀察藍色孔即為陽性；參看此孔對應(yīng)的酶標二抗就知道此株單抗的Ig類別或亞型。如果需要記錄數(shù)值，2M硫酸終止反應(yīng)后用酶標儀450、630nm雙波長讀數(shù)判定;

如果同時多孔顯色，取最高值作為亞型判定標準；

注：單抗屬于雜交瘤融合的來，存在一定比例的變異，另外，如果待檢樣品濃度太高也容易造成背景偏高，原則上以高值孔對應(yīng)的亞類為準！

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注意事項：

1.使用前請查看瓶身確認試劑是否在有效期內(nèi)；

2.本試劑為濃縮型，稀釋1000倍后才可使用，本產(chǎn)品最大可以稀釋為1000倍，仍可以正常工作，但建議您不要這樣操作，由此帶來的結(jié)果偏差及其他問題，售后不負責處理；

3.實驗過程中自配試劑一定要確保準確，不能含有對酶活抑制成分（比如疊氮鈉，酶抑制劑及各種強離子螯合劑）；

4.稀釋后的試劑，立即使用，不可存放下次再用；如果稀釋液中含有合適的防腐劑和穩(wěn)定劑可以存放在4℃保存，一年內(nèi)仍可使用；專用稀釋液可聯(lián)系我們購買

5.本實驗過程中所有的試劑溶液，如果不方便配制都可以聯(lián)系我們購買。

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特別提示：

不具備ELISA基礎(chǔ)知識和操作的人員不要完成此實驗或類似實驗，因為這可能會給您帶來錯誤的結(jié)果和不必要的損失。

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技術(shù)咨詢電話：18627067678? 售后服務(wù)及投訴QQ:2559501005

案例1：

Hepatitis B Virus Core Particles Containing a Conserved Region of the G Protein Combined with Interleukin-35 Protected Mice against Respiratory Syncytial Virus Infection without Vaccine-Enhanced Immunopathology

Jie Yang?,?Chen Ma?,?Yu Zhao?,?Anjing Fan?,?Xiufen Zou?,?Zishu Pan?

J Virol.?2020 Jun 16;94(13):e00007-20.?doi: 10.1128/JVI.00007-20.?Print 2020 Jun 16.

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RSV-specific antibodies (IgG, IgG1, and IgG2a) in the sera of mice were determined by

enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) using purified RSV as the coating antigen (38, 39). Briefly,96-well microtiter plates (Corning, Corning, NY, USA) were coated with 100 ? l of inactivated RSV (1 ? 10 5PFU/well) in coating buffer at 4°C overnight. Serial dilutions of mouse sera in PBS-Tween 20 containing1% bovine serum albumin were added to the wells, and then the plates were incubated for 1 h at 37°C.Horseradish peroxidase-conjugated goat anti-mouse IgG (Thermo Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA,USA) or IgG1 or IgG2a (Friendbio Science & Technology Co., Ltd., Wuhan, Hubei, China)?was added to theplates, and the plates were incubated at 37°C for 1 h. The 3,3=,5,5=-tetramethylbenzidine (TMB; Sigma)substrate in a 100- ? l volume was added to each well, and the plates were incubated for 15 to 20 min atroom temperature. The reaction was stopped with 100 ? l of 2 M H 2 SO 4 , and the optical density at 450 nm was measured using an ELISA reader (Multidkan MK3; Thermo Fisher Scientific).