關(guān)于細(xì)胞計(jì)數(shù)儀你應(yīng)該了解的一切
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??? ? ?血球計(jì)數(shù)板是一種常用的細(xì)胞計(jì)數(shù)工具,醫(yī)學(xué)上通常用來(lái)計(jì)數(shù)紅細(xì)胞、白細(xì)胞等而得名,也常用于計(jì)算一些細(xì)菌、真菌、酵母等微生物的數(shù)量,是一種常見的生物學(xué)工具。

一、血球計(jì)數(shù)板的基本結(jié)構(gòu)
? ? ? ?血球計(jì)數(shù)板由優(yōu)質(zhì)厚玻璃制成,有4個(gè)凹槽口,中間部分被“H”型凹槽分為上下兩個(gè)相同的計(jì)數(shù)平臺(tái)。有9個(gè)主要方格構(gòu)成,角上的方格被進(jìn)一步分為16個(gè)小方格, 中央的方格又稱為計(jì)數(shù)室,被分為25個(gè)小小的方格,每個(gè)小小方格又被分為16個(gè)微型方格。因?yàn)橛?jì)數(shù)室的長(zhǎng)寬各是1mm,所以計(jì)數(shù)室的體積為:1mm*1mm*0.1mm=0.1mm3=10-4mL。而血球計(jì)數(shù)板又分為湯麥?zhǔn)?/strong>和希利格式。
湯麥?zhǔn)?/strong>:大方格內(nèi)分為25中格,每一中格又分為16小格即 25 × 16 型。
希利格式:大方格內(nèi)分為16中格,每一中格又分為25小格即16 × 25 型。


? ? ? ?但是不管計(jì)數(shù)室是哪一種構(gòu)造,它們都有一個(gè)共同的特點(diǎn):即每一大方格都是由400個(gè)小方格組成。
二、細(xì)胞計(jì)數(shù)板的原理
? ? ? ?將已稀釋好的細(xì)胞放入血球計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室內(nèi),使用顯微鏡對(duì)其進(jìn)行計(jì)數(shù),再使用計(jì)算公式對(duì)其計(jì)算即可得出測(cè)試細(xì)胞的濃度。

三、血球計(jì)數(shù)板的使用方法
? ? ? ?在細(xì)胞計(jì)數(shù)中,為了較快而準(zhǔn)確的計(jì)數(shù),一般選擇“S”型計(jì)數(shù)路徑進(jìn)行計(jì)數(shù)。
? ? ? ?如果一個(gè)方格內(nèi)細(xì)胞數(shù)過(guò)多,難以數(shù)清,應(yīng)當(dāng)再對(duì)樣液進(jìn)行適當(dāng)稀釋,一般以每個(gè)小方格內(nèi)分布 4 ~ 5 個(gè)細(xì)胞為宜。如果統(tǒng)計(jì)的每個(gè)中方格內(nèi)的細(xì)胞數(shù)目相互之間相差 20 個(gè)以上,表示細(xì)胞分布不均,必須對(duì)樣液搖勻后重新計(jì)數(shù)。最后再利用計(jì)算公式對(duì)其計(jì)數(shù)結(jié)果進(jìn)行計(jì)算則可得出細(xì)胞的濃度。

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四、血球計(jì)數(shù)板的缺點(diǎn)
? ? ? ?傳統(tǒng)血球計(jì)數(shù)板顯微鏡計(jì)數(shù),人為計(jì)數(shù)主觀性強(qiáng),從樣品混勻-稀釋-加樣到計(jì)數(shù)區(qū)域、換算公式的選擇,焦距調(diào)節(jié),計(jì)數(shù)讀數(shù)等,即便按照規(guī)范的步驟進(jìn)行也會(huì)因?yàn)椴僮髡叩睦斫夂土?xí)慣的差異產(chǎn)生極大的隨機(jī)誤差,計(jì)數(shù)結(jié)果可靠性大打折扣,重復(fù)性差。而利用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀來(lái)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)則可減少大量的誤差與計(jì)數(shù)時(shí)間時(shí)間。據(jù)實(shí)驗(yàn)表明,人工計(jì)數(shù)的時(shí)間通常在15分鐘左右;誤差為10%甚至更高。當(dāng)多位科學(xué)家對(duì)同一樣品進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí),差異甚至超過(guò)20%。而牛頓光學(xué)CytoEasy單樣品(五視野)測(cè)量時(shí)間為10秒,誤差低于5%。
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