Transwell這項(xiàng)技術(shù)的主要材料是Transwell小室（Transwell chamber，Transwell insert），其外形為一個可放置在孔板里的小杯子，不同廠家對Transwell會有不同的命名，而不同型號也可有不同形狀，不同大小，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要，可有不同選擇。但無論是何種外形，其關(guān)鍵部分都是一致的，那就是杯子底層的一張有通透性的膜，而杯子其余部分的材料與普通的孔板是一樣。這層膜帶有微孔，孔徑大小有0.1－12.0μm，根據(jù)不同需要可用不同材料，一般常用的是聚碳酸酯膜（polycarbonate membrane）。

將Transwell小室放入培養(yǎng)板中，小室內(nèi)稱上室，培養(yǎng)板內(nèi)稱下室，上室內(nèi)盛裝上層培養(yǎng)液，下室內(nèi)盛裝下層培養(yǎng)液，上下層培養(yǎng)液以聚碳酸酯膜相隔。我們將細(xì)胞種在上室內(nèi)，由于聚碳酸酯膜有通透性，下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內(nèi)的細(xì)胞，從而可以研究下層培養(yǎng)液中的成分對細(xì)胞生長、運(yùn)動等的影響。應(yīng)用不同孔徑和經(jīng)過不同處理的聚碳酸酯膜，就可以進(jìn)行共培養(yǎng)、細(xì)胞趨化、細(xì)胞遷移、細(xì)胞侵襲等多種方面的研究。

?當(dāng)然不同細(xì)胞其體積不同，具體選擇時要考慮到細(xì)胞大小。

（1）共培養(yǎng)體系：小于3.0um孔徑條件下，細(xì)胞不會遷徙通過，因此，若研究不涉及細(xì)胞運(yùn)動能力，不需要細(xì)胞穿過聚碳酸酯膜，則應(yīng)選擇3.0um以下孔徑。常用0.4、3.0um。常用的是0.4&um。將細(xì)胞A種于上室，細(xì)胞B種于下室，可以研究細(xì)胞B分泌或代謝產(chǎn)生的物質(zhì)對細(xì)胞A的影響。

（2）趨化性實(shí)驗(yàn)：可用5.0、8.0、12.0um膜，上室細(xì)胞可穿過聚碳酸酯膜進(jìn)入下室，計(jì)數(shù)進(jìn)入下室的細(xì)胞量可反映下室成分對上室細(xì)胞的趨化能力。

??細(xì)胞B對細(xì)胞A的趨化作用：將細(xì)胞A種于上室，細(xì)胞B種于下室，可以研究細(xì)胞B分泌或代謝產(chǎn)生的物質(zhì)對細(xì)胞A的趨化作用。

??趨化因子對細(xì)胞的趨化作用：將細(xì)胞種于上室，下室加入某種趨化因子，可研究該趨化因子對細(xì)胞的趨化作用。

（3）腫瘤細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)：常用8.0、12.0um膜，上室種腫瘤細(xì)胞，下室加入FBS或某些特定的趨化因子，腫瘤細(xì)胞會向營養(yǎng)成分高的下室跑，計(jì)數(shù)進(jìn)入下室的細(xì)胞量可反映腫瘤細(xì)胞的遷移能力。
（4）腫瘤細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)常用8.0、12.0um膜，原理與腫瘤細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)類似。

作者：海星生物 公眾號：Cas9X細(xì)胞基因編輯
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