熒光素-鬼筆環(huán)肽(Fluorescein Phalloidin,Fluorescently-labeled phalloidin)復(fù)合物是一種偶聯(lián)綠色熒光染料熒光素 (FITC) 的高親和力 F-actin 肌動(dòng)蛋白探針。最大激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)（Ex/Em）:495~496/513~516nm。:

圖1：熒光素-鬼筆環(huán)肽結(jié)構(gòu)式

熒光素-鬼筆環(huán)肽的應(yīng)用

• 可用于可視化和定量組織切片

• 細(xì)胞培養(yǎng)物或無(wú)細(xì)胞制備物中的 F-actin 肌動(dòng)蛋白

• 熒光素鬼筆環(huán)肽復(fù)合物完全兼容細(xì)胞分析過(guò)程使用的其他熒光染色劑，包括熒光蛋白、Qdot? 納米晶體和 Alexa Fluor? 偶聯(lián)物（包括二抗）。

熒光素-鬼筆環(huán)肽(Fluorescein Phalloidin)使用方法：
一、制備? Fluorescein Phalloidin 工作溶液：
在含有 1% BSA 的 1 mL PBS 中加入 1 μL 的 1000× 熒光素鬼筆環(huán)肽 DMSO 溶液。
注意：
1. 不同的細(xì)胞類(lèi)型可能會(huì)有不同的染色。熒光素鬼筆環(huán)肽工作溶液的濃度應(yīng)相應(yīng)配制。
2. 1% 牛血清白蛋白 (BSA) 用于減少非特異性背景染色。
二、染色細(xì)胞：
1. 用 PBS 清洗細(xì)胞 2-3 次。在室溫下將細(xì)胞固定在 PBS 中的 3.7% 無(wú)甲醇甲醛溶液中 10-30 分鐘。
注意：避免使用任何含有甲醇的固定劑，因?yàn)榧状紩?huì)在固定過(guò)程中破壞肌動(dòng)蛋白。優(yōu)選的固定劑是不含甲醇的甲醛。
2. 用 PBS 清洗固定的細(xì)胞 2-3 次。
3. 可選：將 PBS 中的 0.1% Triton X-100 添加到固定細(xì)胞中 3-5 分鐘以增加滲透性。在 PBS 中清洗細(xì)胞 2-3 次。
4. 將熒光素鬼筆環(huán)肽工作液100 μL/孔（96孔板）加入固定的細(xì)胞中，室溫染色20～90分鐘。
5. 用 PBS 輕輕沖洗細(xì)胞 2-3 次，以去除多余的熒光素鬼筆環(huán)肽。
6. 在所需的 Ex/Em 波長(zhǎng)下運(yùn)行熒光顯微鏡或其他設(shè)備（熒光素鬼筆環(huán)肽，Ex/Em=497/516 nm）。

圖2：熒光素-鬼筆環(huán)肽熒光光譜