今天瑞禧生物小編為大家分享的是CD63抗體偶聯(lián)磁珠外泌體/外泌體標(biāo)記蛋白分子PLAP/蛋白CD9/蛋白LAMP的制備研究，和小編一起來看看！

基于CD63抗體偶聯(lián)磁珠的外泌體分離方法﹐包括以下步驟:

S1:在streptactin磁珠的表面修飾CD63抗體,得到CD63抗體偶聯(lián)磁珠;

S2:過濾待測細(xì)胞培養(yǎng)上清液樣本,將過濾后的待測細(xì)胞培養(yǎng)上清液樣本與CD63抗體偶聯(lián)磁珠混合并孵育﹐得到孵育后的混合物;

S3:分離S2中孵育后的混合物,得到磁吸附物和分離液;

S4:洗滌磁吸附物,將洗滌后的磁吸附物與洗脫緩沖液混合并孵育﹐使固液分離,收集外泌體提取液。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于CD63抗體偶聯(lián)磁珠的外泌體分離方法,其特征在于，所述S2中,待測細(xì)胞培養(yǎng)上清液樣本與CD63抗體偶聯(lián)磁珠的質(zhì)量比為500ul:0.3~0 .5mg。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種基于CD63抗體偶聯(lián)磁珠的外泌體分離方法,其特征在于，所述S2中,待測細(xì)胞培養(yǎng)上清液樣本與CD63抗體偶聯(lián)磁珠孵育的時(shí)間為10-15min,孵育溫度為4℃。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于CD63抗體偶聯(lián)磁珠的外泌體分離方法,其特征在于，所述S4中,洗滌磁吸附物的次數(shù)為2-3次。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于CD63抗體偶聯(lián)磁珠的外泌體分離方法,其特征在于，所述S4中,洗滌后的磁吸附物與洗脫緩沖液的質(zhì)量比為0.5mg :0.5～1mL。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種基于CD63抗體偶聯(lián)磁珠的外泌體分離方法,其特征在于，所述S4中,磁吸附物與洗脫緩沖液孵育時(shí)間為10min。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種基于CD63抗體偶聯(lián)磁珠的外泌體分離方法,其特征在于，所述S4中,將洗滌后的磁吸附物與洗脫緩沖液混合并孵育使固液分離時(shí),洗脫緩沖液洗脫的次數(shù)為2-3次。

可獲得高純度的外泌體,不影響外泌體的結(jié)構(gòu)形態(tài)和生理功能﹐分離特異性強(qiáng),重復(fù)性好,提高了對(duì)外泌體的捕獲效率,并在溫和條件下無損釋放捕獲的外泌體,以達(dá)到回收外泌體用于后續(xù)研究的目的,操作簡單快速,解決現(xiàn)有技術(shù)中外泌體分離方法分離純度低、影響外泌體功能分析及工程化應(yīng)用的缺陷問題。

相關(guān)產(chǎn)品：

GATA-4基因修飾骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSC)外泌體

PTGDS基因修飾間質(zhì)干細(xì)胞外泌體

ASPH基因修飾外泌體

基因DEMEs修飾外泌體

微小RNA-1(miR-1)修飾外泌體

miR-10a-5p修飾骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體

外泌體包裹AAV靶基因載體

外泌體修飾靶基因是FOXN3

間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體修飾microRNA-1246

miR27b3p轉(zhuǎn)基因修飾外泌體

CasRx基因修飾外泌體

miR-126-3p修飾外泌體

miR-20b-5p修飾外泌體

miR--664--5p修飾外泌體

miR-204修飾外泌體

miR-200修飾外泌體

RXYWX.2022.4.27