關(guān)于外泌體檢測(cè),新手需要了解哪些信息?
外泌體(Exosomes)是細(xì)胞分泌到胞外的一種囊泡(Extracellular Vesicles,EVs),其大小為30-150nm,具有雙層膜結(jié)構(gòu)和茶托狀形態(tài),含有豐富的內(nèi)含物(包括核酸、蛋白和脂質(zhì)等),參與細(xì)胞間的分子傳遞。
?
一、外泌體研究分析
?
1、外泌體和腫瘤干細(xì)胞
腫瘤干細(xì)胞(CSCs),又叫腫瘤起始細(xì)胞,能夠介導(dǎo)腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。

特性:
自我更新能力;無限增殖能力;對(duì)腫瘤治療(如化療)耐受
?
外泌體在維持CSCs動(dòng)態(tài)平衡中的作用:
A:CSCs分化為腫瘤細(xì)胞,腫瘤細(xì)胞去分化為CSCs;
B&C:外泌體在non-CSCs和CSCs仙湖轉(zhuǎn)換中的作用。
?
外泌體通過傳遞干性相關(guān)分子誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞去分化獲得干性表型;腫瘤來源外泌體也會(huì)影響腫瘤微環(huán)境中周圍細(xì)胞,且這些非腫瘤細(xì)胞能夠通過釋放外泌體來促進(jìn)腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。

?
靶向外泌體信號(hào)通路可能打破這一動(dòng)態(tài)平衡,相比于靶向CSCs和non-CSCs治療,這可能會(huì)是新的、更好的治療策略。
?
2.外泌體和自噬
自噬是一個(gè)動(dòng)態(tài)、保守的細(xì)胞分解代謝過程,由溶酶體介導(dǎo)的細(xì)胞降解系統(tǒng)來降解細(xì)胞內(nèi)過程或受損的細(xì)胞器和蛋白聚集體,從而實(shí)現(xiàn)能量的再循環(huán)。

a.早期內(nèi)涵體-多囊泡體/晚期內(nèi)涵體-管腔內(nèi)囊泡(ILV)-外泌體/溶酶體;
b.起始-吞噬泡-自噬小體-自噬溶酶體-降解和回收;
c.自噬小體+內(nèi)涵體=自噬內(nèi)涵體。
?
二、外泌體檢測(cè)
?
關(guān)于外泌體檢測(cè),Exostep是用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)外泌體的強(qiáng)大試劑。該外泌體檢測(cè)試劑盒是一種簡(jiǎn)單的免疫珠檢測(cè)外泌體的方法,使用的是與珠子結(jié)合的捕獲抗體和與熒光染料偶聯(lián)的檢測(cè)抗體。
?
【1】具體而明確的檢測(cè)
【2】定量分析,熒光與外植體量之間有很好的相關(guān)性。
【3】直接檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液和生物液中的外泌體。無需分離或沉淀
【4】需要的樣品量非常少
【5】靈敏度更高,動(dòng)態(tài)范圍更廣。即使是少量的樣品,也能保證檢測(cè)結(jié)果。
【6】可重復(fù)性
【7】允許外泌體捕獲細(xì)胞群的同時(shí)進(jìn)行免疫表型分析
?
除了外泌體檢測(cè)試劑盒,廣泛而高質(zhì)量的多檢測(cè)/物種驗(yàn)證的外泌體標(biāo)記抗體,對(duì)外泌體檢測(cè)也至關(guān)重要??蒲械缆非衣议L(zhǎng),讓我們拭目以待吧~
?
文章來源:https://www.amyjet.com/featured/exostep.shtml