一、血液一般檢查

1.白細(xì)胞計(jì)數(shù)

1）定義：用白細(xì)胞稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)，將稀釋后的白細(xì)胞懸液沖入計(jì)數(shù)板，顯微觀察計(jì)數(shù)一定體積內(nèi)的白細(xì)胞，再換算為每升血液中的白細(xì)胞數(shù)。

2）試劑：冰醋酸（溶解RBC）；美蘭（與RBC稀釋液區(qū)別）

3）采血部位：采用末梢血（左手無(wú)名指內(nèi)側(cè)）或靜脈血（肘前靜脈）

4）抗凝劑：EDTA

5）微量吸管：一個(gè)刻度10ml。右手中指和拇指按壓皮頭，食指按住上方小孔。橫拿吸管。吸管中吸入的多余血液可以用紙吸走。

6）計(jì)數(shù)區(qū)：9個(gè)大方格。

（1）中間大方格計(jì)數(shù)紅細(xì)胞和血小板，分成25個(gè)中方格，每個(gè)中方格再分為16個(gè)小方格；

（2）四角大方格用于計(jì)數(shù)白細(xì)胞，每個(gè)大方格再分成16個(gè)中方格。

（3）每一個(gè)大方格內(nèi)的體積：1mm×1mm×0.1mm=0.1mm3=0.1μL

7）操作過(guò)程：0.38ml白細(xì)胞稀釋液+20μL血液混勻，吸取10ml混懸液沖池（從蓋玻片和計(jì)數(shù)池的支柱縫隙內(nèi)打進(jìn)去），低倍鏡計(jì)數(shù)白細(xì)胞。

（1）觀察四角大方格的順序：左上、左下、右上、右下

（2）計(jì)數(shù)公式：WBC/L=四個(gè)大方格WBC總數(shù)N/4×10×20×10^6

（×10換算成1μL；×20稀釋倍數(shù)，0.02ml稀釋成0.4ml是20倍；這時(shí)單位是WBC/μL，要換算成WBC/L正好要再乘10^6）

（3）計(jì)數(shù)方法：弓形移動(dòng)，數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右。

8）參考范圍：成人3.5-9.5×109/L，新生兒15×109/L。

9）注意事項(xiàng)：

（1）如果每個(gè)大格之間細(xì)胞數(shù)相差>8個(gè)時(shí)，應(yīng)重新沖池計(jì)數(shù)；

（2）白細(xì)胞數(shù)量過(guò)低時(shí)，如<3×10^9，可以數(shù)八個(gè)大格內(nèi)的細(xì)胞數(shù)，或者吸40μL血減少稀釋倍數(shù)，結(jié)果除以2。

（3）白細(xì)胞數(shù)量過(guò)高，可以增加稀釋倍數(shù)，如如>30×10^9，可以1：100稀釋。

（4）白細(xì)胞稀釋液只破壞無(wú)核RBC而有核RBC則無(wú)法破壞

2.紅細(xì)胞計(jì)數(shù)

1）原理：等滲稀釋液將血液稀釋沖池，顯微鏡下計(jì)數(shù)，再換算。

2）器材：吸耳球

3）操作過(guò)程：1.99ml稀釋液+10μL血液搖勻，沖池靜置。

4）計(jì)數(shù)中央大方格計(jì)數(shù)RBC：

（1）在25個(gè)中方格中選擇四個(gè)角以及中央的五個(gè)中方格，分別技術(shù)這五個(gè)格里面的RBC數(shù)。

（2）計(jì)數(shù)公式：RBC/L=五個(gè)中方格RBC總數(shù)×5×10×200×10^6

（×5：25個(gè)中方格；×10：每一個(gè)大方格容積0.1μL，換算成1μL；×200：0.1μL換算為了2ml；×10^6: 這時(shí)單位是WBC/μL，要換算成WBC/L正好要再乘10^6）

（3）計(jì)數(shù)方法：同白細(xì)胞計(jì)數(shù)。

5）參考值：男4.0-5.5×10^12；女3.5-5.0×10^12；新生兒6-7×10^12

3.血小板計(jì)數(shù)：

1）原理：血液用稀釋液稀釋后，混勻注入計(jì)數(shù)池，低倍鏡計(jì)數(shù)再換算。

2）稀釋液：草酸銨（同時(shí)破壞RBC、WBC）

3）操作過(guò)程：0.38ml血小板稀釋液+20μL血液混勻，吸取10ml混懸液沖池，低倍鏡計(jì)數(shù)

（1）計(jì)數(shù)區(qū)與RBC相同。

（2）計(jì)數(shù)公式：PLT/L=五個(gè)中方格PLT總數(shù)×5×10×20×10^6

（×20稀釋倍數(shù)，0.02ml稀釋成0.4ml是20倍）

4）參考值：100-300×10^9

※假性血小板減少：使用EDTA抗凝可以誘導(dǎo)PLT聚集或巨大血小板的存在。

5）注意事項(xiàng)：

（1）區(qū)別雜質(zhì)和血小板：調(diào)節(jié)準(zhǔn)焦螺旋時(shí)，雜志不會(huì)隨著發(fā)生改變，而血小板因?yàn)榘|(zhì)有折光性而會(huì)產(chǎn)生變化。

（2）沖池時(shí)搖勻，等待血小板完全下沉后再計(jì)數(shù)。

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二、血型鑒定

1.定型原理

1）正向定型：標(biāo)準(zhǔn)的抗A、B血清鑒定紅細(xì)胞膜上的抗原。

2）反向定型：標(biāo)準(zhǔn)的A型和B型紅細(xì)胞鑒定被檢者血清中的抗體。（加做O型紅細(xì)胞，結(jié)果為陰性，可以排除冷凝集現(xiàn)象）

2.注意事項(xiàng)：

1）標(biāo)準(zhǔn)抗A、抗B不能混淆，不能混用棉簽

2）新生兒體內(nèi)存在母親輸送來(lái)的血型抗體，自身抗體效價(jià)低，不宜做反向定型。

3）老年人抗體水平下降，易引起假陰性。但是不代表老年人血型鑒定不做反向定型。

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參考：診斷學(xué)（第九版）-人民衛(wèi)生出版社