ITC等溫滴定量熱---艾柏森
ITC (Isothermal Titration Calorimetry) 是一種用于研究生物分子之間相互作用的分析技術(shù),其在等溫條件下直接測量給予或吸收的熱量變化。ITC是一種廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、藥物研究和生物相互作用研究的工具。
在ITC實驗中,通常有兩種溶液,一種是含有被測定的物質(zhì)(即配體)的溶液,另一種是其相互作用的目標(biāo)分子(即受體)的溶液。兩者被注入同一個細(xì)胞中,通過控制溫度保持恒定,并記錄兩個溶液混合后釋放或吸收的熱量變化。
通過ITC實驗測量到的熱量變化曲線可以提供關(guān)于配體與受體之間的結(jié)合熱力學(xué)參數(shù)的信息,例如結(jié)合常數(shù)(Ka)、焓變(ΔH)以及熵變(ΔS)等。這些參數(shù)可以幫助研究人員理解分子間相互作用的強(qiáng)度、結(jié)合機(jī)制和熱力學(xué)性質(zhì)。
ITC實驗的優(yōu)點包括直接測量熱量變化、不需要標(biāo)記物以及可以用于研究各種生物分子間的相互作用(如蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)-小分子、DNA-蛋白質(zhì)等)。然而,ITC也有一些限制,比如需要高純度的樣品、配體與受體的親和力應(yīng)在可測范圍內(nèi)等。
總結(jié)來說,ITC(等溫滴定量熱)是一種通過測量生物分子間熱量變化來研究它們的相互作用的技術(shù)。通過測量給予或吸收的熱量變化,可以得到一系列熱力學(xué)參數(shù),這些參數(shù)對于了解生物分子相互作用的特性和機(jī)制非常有價值。
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