重組SUMO酶

產(chǎn)品貨號(hào)： ：FrdE0007

儲(chǔ)存溫度：?-20℃

來源 ：?E.coli。

1.?產(chǎn)品簡(jiǎn)介

SUMO蛋白酶識(shí)別完整的含有100個(gè)氨基酸的SUMO（Small Ubiquitin-like Modifier）標(biāo)簽蛋白，并能高效地把SUMO從融合蛋白上切割下來。與EK和TEV等蛋白酶的識(shí)別位點(diǎn)相比，由于其識(shí)別序列長(zhǎng)，所以SUMO蛋白酶酶切反應(yīng)有很高的特異性，且在較寬范圍的反應(yīng)環(huán)境體系中保持較高的活力，例如溫度（4-30℃）、pH（5.5-9.5）等。SUMO蛋白酶還具有多聚His標(biāo)簽，便于使用親和層析的方法，去除SUMO蛋白酶，純化目的蛋白。

2.?產(chǎn)品特性

中文別名（Chinese synonym）

SUMO蛋白酶

英文別名（English synonym）

SUMO Protease

來源（Source）

大腸桿菌表達(dá)

標(biāo)簽（label）

多聚His標(biāo)簽

純度（Purity）

經(jīng)SDS-PAGE及HPLC分析，純度> ? 90%

分子量（Molecular weight）

26.55 kDa

緩沖液組分（Buffer）

500 mM Tris-HCl, pH 8.0、2% Igepal (NP-40)、1.5 M NaCl、10 mM DTT

活力單位：30℃，SUMO Protease 1小時(shí)酶切2ug含有酶切位點(diǎn)的融合蛋白，酶切效率達(dá)85%以上所需的酶量定義為1個(gè)酶活力單位，即1U。

3.?使用方法

3.1.?在EP管中配制如下反應(yīng)體系（建議）

組分

體積

融合蛋白?

20?μg

10X SUMO Protease Buffer?

20?μL

ddH2O?

to 190?μL

SUMO Protease

10?μL

?

Total volume

200?μL

3.2. 30℃孵育，在0.5、1、2、3小時(shí)分別吸出30 μL上述反應(yīng)液，置于單獨(dú)的EP管中。

3.3.?向上述EP管中加入30 μL?2×SDS Loading Buffer，置于-20℃。

3.4.?樣品全部反應(yīng)完畢后，樣品煮沸5 min，取40 μL進(jìn)行SDS-PAGE分析。確定最佳反應(yīng)時(shí)間。

【注】如融合蛋白要求低溫處理，可將反應(yīng)液置于4℃，延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間，并增加SUMO酶用量，以保證酶切效果。

?

表1. 不同溫度下SUMO蛋白酶切活性

反應(yīng)時(shí)間（h）

不同溫度下剪切活性（%）

4℃

16℃

25℃

30℃

0.5

48

73

83

88

1

60

87

90

93

2

71

94

94

95

3

74

95

95

95

4.?儲(chǔ)存條件

長(zhǎng)期儲(chǔ)存于-80℃，或解凍后保存于-20℃。

5.?產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

無動(dòng)物源性：重組生產(chǎn)，無外源性的病毒污染，生產(chǎn)過程不使用任何動(dòng)物源原料。

質(zhì)量穩(wěn)定：批量生產(chǎn)，可保證穩(wěn)定連續(xù)的批次生產(chǎn)；產(chǎn)品批次間無差異，質(zhì)量穩(wěn)定。

純度高：比活高；宿主蛋白殘留小于生物制品限度要求。

?

*本試劑僅供實(shí)驗(yàn)室研究使用