抗體藥物主要是指利用人工合成或生物工程技術(shù)生產(chǎn)的模擬人體免疫系統(tǒng)中自然產(chǎn)生的抗體的藥物。這些藥物可以特異性地識(shí)別并結(jié)合到體內(nèi)的特定目標(biāo)（通常是蛋白質(zhì)），從而實(shí)現(xiàn)治療效果。抗體藥物的種類(lèi)繁多，如單克隆抗體（mAbs）、雙特異性抗體（bispecific antibodies）、抗體藥物偶聯(lián)物（ADCs）等。N端測(cè)序是一種分析蛋白質(zhì)、多肽以及抗體N末端氨基酸序列的方法，對(duì)于抗體藥物來(lái)說(shuō)，N端測(cè)序尤為重要。因?yàn)榭贵w是由兩個(gè)重鏈和兩個(gè)輕鏈通過(guò)二硫鍵連接起來(lái)的復(fù)雜蛋白質(zhì)，每條鏈的N端（即氨基端）的序列對(duì)于抗體的特異性結(jié)合能力至關(guān)重要。通過(guò)N端測(cè)序，我們可以確保抗體的氨基酸序列正確，沒(méi)有錯(cuò)誤的氨基酸殘基，也沒(méi)有意外的化學(xué)修飾。

目前，N端測(cè)序通常使用Edman降解法進(jìn)行。這種方法是通過(guò)連續(xù)的化學(xué)反應(yīng)，逐個(gè)去除抗體的N端氨基酸，并對(duì)每個(gè)去除的氨基酸進(jìn)行識(shí)別。這個(gè)過(guò)程可以重復(fù)進(jìn)行，直到得到足夠長(zhǎng)的氨基酸序列。然而，這種方法比較耗時(shí)，并且需要足夠大量的抗體樣品。

生物制品表征N端測(cè)序示意圖

除了Edman降解法，質(zhì)譜技術(shù)（尤其是串聯(lián)質(zhì)譜）也被廣泛用于抗體蛋白質(zhì)的氨基酸序列分析，質(zhì)譜法將抗體蛋白消化成5-25個(gè)氨基酸的肽，隨即通過(guò)LC-MS/MS分析檢測(cè)，將采集的數(shù)據(jù)與理論序列數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行匹配，進(jìn)而確認(rèn)N端序列。質(zhì)譜可以測(cè)出封閉和修飾的抗體蛋白藥物N末端，且已成為首選的全長(zhǎng)抗體測(cè)序方法。Edman降解法與質(zhì)譜法不同，其不需要借助蛋白數(shù)據(jù)庫(kù)便可以直接進(jìn)行序列分析。但它不能用于N-末端封閉或修飾后的氨基酸殘基。

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百泰派克生物科技抗體藥物表征內(nèi)容