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組培室設(shè)計方案與儀器設(shè)備-農(nóng)卉組培

2022-05-11 11:56 作者:上海農(nóng)卉組培  | 我要投稿

 組培室是近年來比較流行的一種培養(yǎng)植物的地方,能夠清楚的觀察植物的生長,具有普通培養(yǎng)方式不具備的優(yōu)點,一套完整的組織培養(yǎng)房間是需要有一些設(shè)施備的,這一些設(shè)備也是培養(yǎng)植物不可缺少的,究竟需要配備哪些組培設(shè)備呢?針對這個問題,我們來一起了解下。

  實驗室的建設(shè)均需考慮兩個方面的問題:一是所從事的實驗的性質(zhì),即是生產(chǎn)性的還是研究性的,是基本層次的還是較高層次的;二是實驗室的規(guī)模,規(guī)模主要取決于經(jīng)費和實驗性質(zhì)。無論實驗室的性質(zhì)和規(guī)模如何,實驗室設(shè)置的基本原則是:科學(xué)、、經(jīng)濟和實用。一個組織培養(yǎng)實驗室必須滿足3個基本的需要:實驗準(zhǔn)備(培養(yǎng)基制備、器皿洗滌、培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿滅菌)、無菌操作和控制培養(yǎng)。此外,還可根據(jù)從事的實驗要求來考慮輔助實驗室及其各種附加設(shè)施,使實驗室更加完善。

  在進(jìn)行植物組織培養(yǎng)工作之前,首先應(yīng)對工作中需要哪些基本的設(shè)備條件有個全面的了解,以便因地制宜地利用現(xiàn)有房屋,或新建、改建實驗室。實驗室的大小取決于工作的目的和規(guī)模。以工廠化生產(chǎn)為目的,實驗室規(guī)模太小,則會限制生產(chǎn),影響效率。在設(shè)計組織培養(yǎng)實驗室時,應(yīng)按組織培養(yǎng)程序來設(shè)計,避免某些環(huán)節(jié)倒排,引起日后工作混亂。植物組織培養(yǎng)是在嚴(yán)格無菌的條件下進(jìn)行的。要做到無菌的條件,需要一定的設(shè)備、器材和用具,同時還需要人工控制溫度、光照、濕度等培養(yǎng)條件。

  基本實驗室包括準(zhǔn)備室、洗滌滅菌室、無菌操作室、培養(yǎng)室、緩沖間,是組織培養(yǎng)實驗所必須具備的基本條件。如進(jìn)行工廠化生產(chǎn),年產(chǎn)4萬-20萬,需3-4間實驗用房,總面積60平方米。


  1、準(zhǔn)備室(化學(xué)實驗室)


  功能:又叫化學(xué)實驗室,進(jìn)行一切與實驗有關(guān)的準(zhǔn)備工作:完成所使用的各種藥品的貯備、稱量、溶解、器皿洗滌、培養(yǎng)基配制與分裝、培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿的滅菌、培養(yǎng)材料的預(yù)處理等。


  要求:好有20平方米左右。要求寬敞明亮、以便于放置多個實驗臺和相關(guān)設(shè)備,方便多人同時工作;同時要求通風(fēng)條件好,便于氣體交換;實驗室地面應(yīng)便于清潔,并應(yīng)進(jìn)行防滑處理。

  分類:分體式-研究性質(zhì)實驗室,分開的若干房間將準(zhǔn)備室分解為藥品貯藏室、培養(yǎng)基配制與洗滌室和滅菌室等,功能明確,便于管理,但不適于大規(guī)模生產(chǎn)。通間式-規(guī)?;瘜嶒炇遥瑴?zhǔn)備室一般設(shè)計成大的通間,使試驗操作的各個環(huán)節(jié)在同一房間內(nèi)按程序完成。準(zhǔn)備試驗的過程在同一空間進(jìn)行,便于程序化操作與管理,試驗中減少各環(huán)節(jié)間的銜接時間,從而提高工作效率。此外還便于培養(yǎng)基配制、分裝和滅菌的自動化操作程序設(shè)計,從而減少規(guī)模化生產(chǎn)的人工勞 動,更便 于無菌條件的控制和標(biāo)準(zhǔn)化操作體系的建立。


  設(shè)備:準(zhǔn)備室應(yīng)具備實驗臺、藥品柜、水池、儀器、藥品、防塵櫥(放置培養(yǎng)容器)、冰箱、天平、蒸餾水器、酸度計及常用的培養(yǎng)基配制用玻璃儀器等。


  2、洗滌滅菌室


  功能:完成各種器具的洗滌、干燥、保存、培養(yǎng)基的滅菌等。要求:洗滌滅菌室根據(jù)工作量的大小決定其大小,一般面積控制在30-50m2。在實驗室的一側(cè)設(shè)置專用的洗滌水槽,用來清洗玻璃器皿。中央實驗臺還 應(yīng)配置2個水槽,用于清洗小型玻璃器皿。如果工作量大,可以購置一臺洗瓶機。準(zhǔn)備1-2個洗液缸,專門用于洗滌對潔凈度要求很高的玻璃器皿,地面應(yīng)耐濕并 排水良好。設(shè)備:水池、落水架、中央實驗臺、高壓滅菌鍋、超聲波清洗器、干燥滅菌器(如烘箱)等。

  3、無菌操作室(接種室)


  功能:也叫接種室,主要用于植物材料的消毒、接種、培養(yǎng)物的轉(zhuǎn)移、試管苗的繼代、原生質(zhì)體的制備以及一切需要進(jìn)行無菌操作的技術(shù)程序,是植物離體培養(yǎng)研究或生產(chǎn)中關(guān)鍵的一步。


  要求:接種室宜小不宜大,一般7~8平米(10-20平米)即可,其規(guī)模根據(jù)實驗需要和環(huán)境控制的難易程度而 定。要求封閉性好,干爽安靜,清潔明亮,能較長時間保持無菌,因此不易設(shè)在容易受潮的地方;地面、天花板及四壁盡可能密閉光滑,易于清潔和消毒;配置拉動門,以減少開關(guān)門時的空氣擾動;為便于消毒處理,地面及內(nèi)墻壁都應(yīng)采用防水和耐腐蝕材料;為了保持清潔,無菌室應(yīng)防止空氣對流。接種室要求在適當(dāng)位置吊裝 1~2盞紫外線滅菌燈,用以照射滅菌。好安裝一小型空調(diào),使室溫可控,這樣可使門窗緊閉,減少與外界空氣對流。


  一般新建實驗室的無菌室在使用之前應(yīng)進(jìn)行滅菌處理,處理方法是甲醛和高錳酸鉀熏蒸,并需定期滅菌處理,還可用紫外線照射1-2h/周,或每次使用前照射10-30min。

  設(shè)備:紫外燈、空調(diào)、解剖鏡、消毒器、酒精燈、接種器械(接種鑷子、剪刀、解剖刀、接種針),實驗臺、和擱架,還有超凈工作臺和整套滅菌接種儀器、藥品等。


  4、培養(yǎng)室


  功能:對接種到培養(yǎng)瓶等器皿中的植物離體材料進(jìn)行控制條件下的培養(yǎng),無論是研究性實驗室還是生產(chǎn)性實驗材料進(jìn)行培養(yǎng)的場所。


  要求:約需 10-20平方米左右,培養(yǎng)室的大小可根據(jù)需要培養(yǎng)架的大小、數(shù)目、及其他附屬設(shè)備而定,其設(shè)計以充分利用空間和節(jié)省能源為原則?;疽笫悄軌蚩刂乒庹蘸蜏囟?,并保持相對的無菌環(huán)境,因此,培養(yǎng)室應(yīng)保持清潔和適度干燥;為滿足植物培養(yǎng)材料生長對氣體的需要,還應(yīng)安裝排風(fēng)窗和換氣扇等培養(yǎng)室的換氣裝置;為節(jié)省能源和空間,應(yīng)配置適宜的培養(yǎng)架,并安裝日光燈照明。


  培養(yǎng)室重要的因子是溫度,一般保持在20—27℃左右,具備產(chǎn)熱裝置,并安裝窗式或立式空調(diào)機。由于熱帶植物和寒帶植物等不同種類要求不同溫度,好不同種類有不同的培養(yǎng)室。


  室內(nèi)濕度也要求恒定,相對濕度以保持在70%~80%為好,可安裝加濕器??刂乒庹諘r間可安裝定時開關(guān)鐘,一般需要每天光照10-16h,也有的 需要連續(xù)照明。短日照植物需要短日照條件,長日照植物需要長日照條件。現(xiàn)代組培實驗室大多設(shè)計為采用天然太陽光照作為主要能源,這樣不但可以節(jié)省能源,而且組培苗接受太陽光生長良好,馴化易成活。在陰雨天可用燈光作補充。


  設(shè)備:培養(yǎng)架(控溫控光控濕)、搖床、轉(zhuǎn)床、自動控時器、紫外燈、光照培養(yǎng)箱或人工氣候箱、生化培養(yǎng)箱、邊臺實驗臺用于拍攝培養(yǎng)物生長狀況,除濕機、顯微鏡、溫濕度計、空調(diào)等。


  5、緩沖間


  功能:是進(jìn)入無菌室前的一個緩沖場地,減少人體從外界帶入的塵埃等污染物。工作人員在此換上工作服、拖鞋,戴上口罩,才能進(jìn)入無菌室和培養(yǎng)室。進(jìn)入無菌操作室前在此更衣?lián)Q鞋,以減少進(jìn)出時帶入接種室雜菌。


  要求:緩沖間需3-5平方米,可建在準(zhǔn)備室外或無菌操作室外,應(yīng)保持清潔無菌;備有鞋架和衣帽掛鉤,并有清潔的實驗用拖鞋、已滅菌過的工作服;墻頂用1-2盞紫外燈定時照射,對衣物進(jìn)行滅菌。緩沖間好也安一盞紫外線滅菌燈,用以照射滅菌。緩沖間的門應(yīng)該與接種室的門錯開,兩個門也不要同時開啟,以保證無菌室不因開門和人的進(jìn)出帶進(jìn)雜菌。


  設(shè)備:1-2盞紫外燈、水槽、實驗臺、鞋帽架、柜子、滅菌后的工作服、拖鞋、口罩。


  一、常規(guī)設(shè)備


  1、天平


  組織培養(yǎng)實驗室需要2-3臺不同的天平。


  感量0.001g的天平(分析天平)和感量0.0001g的天平(電子天平)用于稱量微量元素和一些較高度的實驗用品。


  2、冰箱


  培養(yǎng)基母液均需低溫報存,某些試驗還需植物材料進(jìn)行低溫處理,一般普通冰箱即可。


  3、酸度計


  用于測定培養(yǎng)基及其它溶液的pH,一般要求可測定pH范圍1-14之間,準(zhǔn)確度0.01即可。


  4、離心機


  用于細(xì)胞、原生質(zhì)體等活細(xì)胞分離,亦用于培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞器、核酸以及蛋白質(zhì)的分離提取。根據(jù)分離物質(zhì)不同配置不同類型的離心機。


  二、滅菌設(shè)備


  1、高壓滅菌鍋


  用于培養(yǎng)基、玻璃器皿以及其它可高溫滅菌用品的滅菌,根據(jù)規(guī)模大小有手提式、立式、臥式等不同規(guī)格。


  2、干熱消毒柜


  用于金屬工具如鑷子、剪刀、解剖刀,以及玻璃器皿的滅菌。一般選用200℃左右的普通或遠(yuǎn)紅外消毒柜。


  三、組培設(shè)備


  組培設(shè)備是指根據(jù)需要所選用的不同規(guī)格和控制準(zhǔn)確度的用于植物細(xì)胞、組織和器官培養(yǎng)的設(shè)施和設(shè)備。


  1、培養(yǎng)架


  目前培養(yǎng)架是組培室植株繁殖培養(yǎng)的通用設(shè)施,具有成本低、設(shè)計靈活、可充分利用培養(yǎng)空間等點,以操作方便、大限度利用培養(yǎng)空間為原則。一般有4-5層,層間間隔40-50cm,光照強度可根據(jù)培養(yǎng)植物特性來確定,一般每架上配備2-4盞日光燈。


  2、培養(yǎng)箱


  細(xì)胞培養(yǎng)、原生質(zhì)體培養(yǎng)等要求培養(yǎng)的實驗,可用光照培養(yǎng)箱、CO2培養(yǎng)箱、濕度控制培養(yǎng)箱等培養(yǎng)。


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