抗體內(nèi)化能力方案丨艾美捷ZAP生物素化內(nèi)化試劑盒研究
單克隆抗體目前被廣泛用于抗癌、抗炎和抗病毒治療。評價(jià)一款抗體藥物有效性和安全性的一個(gè)重要特性是細(xì)胞內(nèi)化的程度、位置和速度??贵w藥物偶聯(lián)物(Antibody-Drug Conjugate,ADC)是通過一個(gè)化學(xué)鏈接將具有生物活性的細(xì)胞毒性藥物連接到單抗上。抗體內(nèi)化能力是?ADC藥物早期篩選的一項(xiàng)重要指標(biāo)。
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ZAP生物素化內(nèi)化試劑盒 (適用于生物素化一抗及其他靶向劑) 與用戶提供的生物素化靶向劑(如一抗)結(jié)合,再靶向細(xì)胞表面的抗原,從而篩選真正起作用的靶向物。
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ZAP生物素化內(nèi)化試劑盒適用的靶向物類別包括:
○一抗
○多肽
○蛋白配體
○核酸適配體
○細(xì)胞因子
○其它任何與靶細(xì)胞表面結(jié)合的靶向物
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ZAP生物素化內(nèi)化試劑盒艾美捷體內(nèi)測定,靶向劑案例展示:
靶向劑種類:Streptavidin-ZAP (KIT-27-A)
該試劑盒包括用于主要抗體宿主物種的Streptavidin ZAP(IT-27)和BIgG SAP對照綴合物。
鏈親和素ZAP是鏈親和素和核糖體失活蛋白saporin的化學(xué)偶聯(lián)物。它將生物素化物質(zhì)轉(zhuǎn)化為目標(biāo)毒素。
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該試劑盒將生物素化物質(zhì)轉(zhuǎn)化為靶向毒素,并允許評估試劑與受體結(jié)合后內(nèi)化的能力。它是體內(nèi)篩選生物素化抗體的完-美工具。

圖:KNRK細(xì)胞以2500個(gè)細(xì)胞/孔接種孵育過夜。鏈霉親和素ZAP是與生物素化-IB4等摩爾預(yù)混濃度??瞻譙treptavidin SAP,IB4-然后以10ul體積加入SAP和Streptavidin ZAP+生物素化dB4混合物培養(yǎng)板72小時(shí)。XTT/PMS混合物以50ul的體積添加到每個(gè)孔和板中在450nm下讀取,并使用Prism進(jìn)行數(shù)據(jù)分析軟件(GraphPad,圣地亞哥)。
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文獻(xiàn)參考:
1. Sheriff ST, Xiao C, Chance WT, Kasckow JW, Balasubramaniam A (2002) Selective lesion of
neuropeptide Y (NPY)-receptor neurons in hypothalamus inhibit food intake and reduces body weight inrats. Soc Neurosci Mtg, Orlando FL, Abstract #384.1.
2. Kohls M (2006) Evaluate Potential Targeting Molecules. Nature Methods.