一.正相硅膠柱一般保存在什么溶劑里面比較合適？

? ? ? ?答：短期和長(zhǎng)期都建議保存在正相測(cè)定所用的流動(dòng)相中，一般是正己烷和極少量的異丙醇。

二.磷酸鹽緩沖鹽滲透力強(qiáng)，為什么，是因?yàn)榕c醋酸鹽，枸椽酸鹽相比，基團(tuán)小嗎，使用磷酸鹽緩沖液與其它緩沖液相比，會(huì)使色譜柱壽命縮短多少？

? ? ? ?答：經(jīng)常用磷酸鹽，在其它條件差不多一樣的情況下，柱子壽命肯定比不用磷酸緩沖鹽相對(duì)短一些。但用磷酸鹽也有不可取代的優(yōu)點(diǎn)吧，否則不可能現(xiàn)在大部分人還在用。

三.反相離子對(duì)色譜法中，離子對(duì)是如何起作用的，是離子對(duì)試劑的非極性端溶解在填料的非極性端里，解離端伸向流動(dòng)相，對(duì)含胺化合起離子交換作用，還是樣品與離子對(duì)生成緊密的結(jié)合物，離子對(duì)試劑掩藏化合物中的極性基團(tuán)，還是這種結(jié)合物是在解離與結(jié)合的動(dòng)態(tài)平衡之中？

? ? ? ?答：首先離子對(duì)試劑的解離端和目標(biāo)離子形成離子締合物，降低其極性，這樣就能較好的在柱子上保留。再者，根據(jù)疏水效應(yīng)理論，離子對(duì)試劑的疏水端是很容易和C18鏈相互作用的，這樣更容易在柱子上保留，所以我認(rèn)為離子對(duì)試劑作用是混合保留機(jī)制，即純粹的反相保留和離子對(duì)保留機(jī)制共同作用。

四.四烷基季銨鹽（如四丁基硫酸氫銨、四丁基溴化銨、四丁基氫氧化銨等）在水中電離后，也形成了類似N＋H(CH2CH3)3的結(jié)構(gòu)N＋(CH2CH2CH2CH3)4，這種結(jié)構(gòu)也能有效的與Si－O－產(chǎn)生較強(qiáng)的靜電作用，此類離子對(duì)用的比較少，但它的作用僅是掩藏Si－O－嗎，它對(duì)物質(zhì)的保留性能有何影響，實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)檢測(cè)胺化物時(shí)，流動(dòng)相中加入磷酸緩沖鹽有增加物質(zhì)保留的趨勢(shì)，而加入三乙胺則會(huì)降低物質(zhì)的保留能力？

? ? ? ?答：前面提到的四丁基氫氧化銨等離子對(duì)試劑確實(shí)不如辛磺酸鈉等極性基是陰離子的離子對(duì)試劑用得普遍，原因是酸類極性物質(zhì)很容易通過降低pH值的方法提高在反相色譜中的保留能力，降低pH可抑制酸的電離，使酸處于中性狀態(tài)而與疏水碳鏈的作用力增強(qiáng)。而堿類分析物則受硅膠基質(zhì)pH上限的嚴(yán)重影響（以前上限是8，后來(lái)抬到10，直到最近雜化硅膠才將pH上限提到12左右）。

? ? ? ?銨鹽類離子對(duì)試劑確實(shí)有辛磺酸鈉等所不具有的屏蔽硅醇基作用，但其主要作用還是疏水端和疏水固定相結(jié)合，外露的陽(yáng)離子親水端和酸陰離子作用，從而提高其保留能力。當(dāng)然同樣還有第二種解釋機(jī)理，離子對(duì)試劑先和分析物結(jié)合，掩藏極性基，從而提高極性分析物在反相色譜中的保留能力。而且丁基比辛基疏水性差，這種情況下，認(rèn)為后面的結(jié)合機(jī)理占上風(fēng)的可能性更大。

? ? ? ?檢測(cè)胺類化合物，加入三乙胺預(yù)先和硅醇基結(jié)合，胺和硅醇基作用被三乙胺取代，保留下降是肯定的。

五.同一根色譜柱在分析完三聚氰胺后，再分析苯甲酸、山梨酸、糖精鈉時(shí)為什么保留時(shí)間會(huì)提前？

? ? ? ?答：色譜柱被強(qiáng)保留物質(zhì)污染后，保留時(shí)間提前和滯后的情況都有，具體要看污染物的性質(zhì)，還要看分析物、固定相和污染物三者共同作用的情況，情況比較復(fù)雜，有時(shí)候比較難預(yù)測(cè)是提前還是滯后。不過你平時(shí)維護(hù)的時(shí)候，注意在測(cè)定后將污染物用有機(jī)溶劑反沖清洗，就可以減輕或避免這種情況的出現(xiàn)。建議每個(gè)分析方法用專門的色譜柱，長(zhǎng)遠(yuǎn)看，這樣更節(jié)省色譜柱的費(fèi)用。

總結(jié)

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