植物病毒在寄主體內分布不均勻，懷特（1943）和利馬塞特.科鈕特（1949）發(fā)現(xiàn)，植物根尖和莖尖部分病毒含量極低或不能發(fā)現(xiàn)病毒。植物組織內的病毒含量隨與莖尖相隔距離加大而增加。究其原因可能有四個方面：

其一，一般病毒順著植物的微管系統(tǒng)移動，而分生組織中無此系統(tǒng)；病毒通過胞間連絲移動極慢，難以追上莖尖分生組織的活躍生長；

其二，活躍生長的莖尖分生組織代謝水平很高，致使病毒無法復制；

其三，植物體內可能存在“病毒鈍化系統(tǒng)”，而在莖尖分生組織內活性應最高，鈍化病毒，使莖尖分生組織不受病毒侵染；

其四，莖尖分生組織的生長素含量很高，足以抑制病毒增殖。?

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脫毒方法?

正確選擇品種

用于生產(chǎn)的品種選擇很重要。因不同品種產(chǎn)量、品質特性及對病毒侵染的反應不同，關系到去病毒的增產(chǎn)效果和脫毒種苗的應用年限。因此，要選擇品質好、產(chǎn)量高、抗耐病毒病性好的品種。

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確保品種純度

確保獲取快繁外植體母株的品種純度是生產(chǎn)高純度、優(yōu)質種苗的基礎。特別是栽培歷史長的無性繁殖作物，用種量大、易造成品種混雜。因此嚴格鑒定獲取快繁外植體母株的品種純度，可避免無效勞動，提高工作效率。

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獲得外植體

外植體可直接取于大田，但最好取于室內培育的，選擇生長健壯、無病蟲害的母株，既不受季節(jié)影響，又易消毒。

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選擇培養(yǎng)基

研究確定的基本培養(yǎng)基有許多種，其中MS適合于大多數(shù)雙子葉植物，培養(yǎng)基B5和培養(yǎng)基N6適合于許多單子葉植物，WHITE培養(yǎng)基適于根的培養(yǎng)，應先試用這些培養(yǎng)基再根據(jù)實際情況對其中的某些成分做小范圍調整。一般培養(yǎng)用MS培養(yǎng)基均能成功，但大蒜、洋蔥用B5和N6培養(yǎng)基較好。?

激素濃度和相對比例的確定

用不同種類的激素進行濃度和比例的配合試驗。在比較好組合基礎上進行小范圍的調整，設計出新的配方，經(jīng)過反復摸索，選出一種適合培養(yǎng)基。?

剝離和接種將處理好的植物部分

如包含莖尖的莖段或芽等滅菌，置超凈工作臺40倍顯微鏡下，剝去外葉和較大的葉原基，暴露出生長點分生組織，剝離帶1~2個葉原基的分生組織，接種到試管內的芽分化培養(yǎng)基上。?

繼代培養(yǎng)生根和快繁將已接種外植體的試管置（23±2）℃，光照3000LX，在光周期13-16H/D的培養(yǎng)基中培養(yǎng)2-3周成苗。待苗長至1-2CM高，轉入生根培養(yǎng)基，生長7-10D生根，轉入快繁培養(yǎng)基繼續(xù)繁殖。?

莖尖培養(yǎng)的關鍵技術環(huán)節(jié)?

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剝取適當大小的莖尖

通常培養(yǎng)莖尖越小，產(chǎn)生幼苗的無毒率越高，而成活率越低。不同病毒種類去除的難易程度不同。因此需針對不同的病毒種類，培養(yǎng)適宜大小的莖尖。例如剝離培養(yǎng)帶一個葉原基的生長點產(chǎn)生的馬鈴薯植株，可去處全部馬鈴薯卷葉病毒，去除80%Y病毒和A病毒，去除0.2%X病毒。馬鈴薯病毒去除從易到難的順序是：馬鈴薯卷葉病毒、馬鈴薯A病毒、馬鈴薯Y病毒、奧古巴病毒、馬鈴薯M病毒、馬鈴薯X病毒、馬鈴薯S病毒和紡錘塊莖類病毒。

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對于同一種病毒，剝離莖尖越小，脫毒率越高。大蒜帶1個葉原基的莖尖產(chǎn)生苗中84%檢測不到病毒，而帶2-3個葉原基的無毒株率僅59%。因此，一般剝離帶1-2個葉原基的莖尖即可獲得較好的脫毒效果。對于難脫除的病毒則應配合采用其他措施。?

選用正確的培養(yǎng)基

培養(yǎng)基由大量元素（無機鹽）、微量元素、有機成分、植物激素、糖和瓊脂調配而成。一般銨鹽及鉀鹽濃度高，有利于莖尖成活，反之則有利于生根或根生長，植物激素對莖尖的生長和發(fā)育有重要作用。植物細胞分裂素類如6-BA有利于長芽，而生長素類NAA有利于生根。不同品種對激素的反應不同。?

適宜的環(huán)境條件

大蒜、馬鈴薯、草莓接種后置溫度23-25℃，光照1000-3000LX，每日照光13-16H。甘薯莖尖培養(yǎng)需溫度較高，約26-32℃，光強和照光時間同馬鈴薯和大蒜。?

莖尖接種后的生長及調節(jié)方法，莖尖接種后的生長情況主要有4種。

生長正常，生長點伸長，基本無愈傷組織形成，1-3周內形成小芽，4-6周長成小植株。

生長停止，接種物不擴大，漸變褐色，至枯死。此情況多因剝離操作過程中莖尖受傷。

生長緩慢，接種物擴大緩慢，漸轉綠，成一綠點。說明培養(yǎng)條件不適應，要迅速轉入高激素濃度培養(yǎng)基，并適當提高培養(yǎng)溫度。

生長過速，生長點不伸長或略伸長，大量疏松愈傷組織形成，需轉入無激素培養(yǎng)基或采取降低培養(yǎng)溫度等措施。