HEK293細(xì)胞，也稱為HEK-293、HEK細(xì)胞或簡稱HEK，代表人胚腎細(xì)胞，是眾所周知的最重要的哺乳動(dòng)物瞬時(shí)生產(chǎn)瞬轉(zhuǎn)細(xì)胞之一。這種細(xì)胞類型流行的主要原因之一是HEK細(xì)胞具有高轉(zhuǎn)染效率，可用于高表達(dá)水平的穩(wěn)定和瞬時(shí)轉(zhuǎn)染。

HEK293細(xì)胞的歷史：

HEK293細(xì)胞的歷史可以追溯到1973年，當(dāng)時(shí)荷蘭萊頓大學(xué)的Alex Van Der Eb和他的團(tuán)隊(duì)培養(yǎng)了這種細(xì)胞，其中一位博士后Frank Graham通過腺病毒5進(jìn)行了轉(zhuǎn)染，細(xì)胞命名中的數(shù)字可以追溯到他的第293次實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的原始細(xì)胞克隆這一事實(shí)。由于存在Ad5 E1A/B基因，HEK293常用于生產(chǎn)腺病毒載體和腺相關(guān)病毒載體。同時(shí)由于其易維護(hù)和穩(wěn)健性，快速生長的細(xì)胞系及其衍生物通常應(yīng)用于生物技術(shù)，例如生物制藥的重組抗體表達(dá)以及細(xì)胞生物學(xué)研究。

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HEK293細(xì)胞系列：

HEK有多種衍生細(xì)胞系，每種細(xì)胞系在某些方面彼此不同：

l?HEK293T：表達(dá)SV40T抗原基因，進(jìn)而導(dǎo)致表達(dá)載體的擴(kuò)增，最終增加感興趣的基因表達(dá)。

l?HEK293F：是一種HEK293野生型株，在無血清培養(yǎng)基中快速生長，具有高水平的蛋白表達(dá)。

l?HEK293E：表達(dá)EBNA1，EBNA1能夠促進(jìn)游離DNA的核轉(zhuǎn)移，從而提高增強(qiáng)子活性促進(jìn)蛋白產(chǎn)生。

l?HEK293-6E：一種新的293E細(xì)胞系，表達(dá)截?cái)嗟腅BNA1，結(jié)合無血清培養(yǎng)體系進(jìn)行蛋白或病毒載體生產(chǎn)。

l?HEK293FT：用pCMVSPORT6TAg轉(zhuǎn)化293F細(xì)胞，用于生產(chǎn)慢病毒載體。

l?HEK293H：來源于表達(dá)E1A腺病毒基因的HEK293細(xì)胞，用于空斑塊分析和其他錨定依賴應(yīng)用。

l?HEK293S：293S細(xì)胞適合低Ca2+培養(yǎng)基懸浮生長和培養(yǎng)。隨后，對293S細(xì)胞進(jìn)行甲烷磺酸誘變和蓖麻毒素選擇修飾，整合pcDNA6/TR質(zhì)粒，產(chǎn)生293SG；然后用pcDNA3.1-zeo-STendoT質(zhì)粒對293SG細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化，生成293SGGD細(xì)胞，用于糖工程修飾蛋白表達(dá)。

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HEK293優(yōu)勢：

l?快速倍增時(shí)間（約36小時(shí)）；

l?易于培養(yǎng)；

l?可以作為增殖的粘附或懸浮液生長；

l?高再現(xiàn)性和一般一致性；

l?產(chǎn)生大量重組蛋白，尤其是那些在含有CMV啟動(dòng)子的質(zhì)粒載體中的蛋白；

l?瞬態(tài)和穩(wěn)定的基因表達(dá)；

l?通過使用物理和化學(xué)方法易于轉(zhuǎn)染；

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HEK293局限性：

l?細(xì)菌污染的危險(xiǎn)可能會(huì)導(dǎo)致基因表達(dá)出現(xiàn)問題，并有可能失去細(xì)胞活力；

l?特別容易受到病毒污染；

l?其培養(yǎng)期的長短會(huì)對細(xì)胞的健康產(chǎn)生負(fù)面影響；

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HEK293應(yīng)用方向：

HEK293及其子細(xì)胞系在生物技術(shù)和研究中的應(yīng)用非常普遍且用途廣泛，概述如下：

l?受體信號：HEK293可用于細(xì)胞膜受體和離子通道的異源表達(dá)，以及G蛋白偶聯(lián)受體信號通路的研究。

l?蛋白質(zhì)生產(chǎn)：HEK293可大規(guī)模生產(chǎn)重組蛋白，可用于制造生物治療性蛋白和疫苗。

l?癌癥研究：HEK293具有致瘤性，適用于檢測癌癥治療效果。

l?基因表達(dá)實(shí)驗(yàn)宿主：HEK293細(xì)胞常用于基因轉(zhuǎn)染，檢測表達(dá)蛋白，是誘導(dǎo)型RNA干擾系統(tǒng)研究中常用的方法。

l?病毒載體的繁殖：在病毒學(xué)中，HEK293可作為病原體的替代品，因?yàn)樗鼈兊奈ｋU(xiǎn)性較低。