DIA蛋白質(zhì)組學(xué)和iTRAQ分析
DIA是一種質(zhì)譜分析中使用的數(shù)據(jù)采集方式,即數(shù)據(jù)非依賴性采集模式,在這種采集模式下,不用預(yù)先設(shè)定條件對肽段母離子進(jìn)行篩選,而是將整個質(zhì)譜掃描范圍分為多個不同的小窗口,依次并循環(huán)的對每個窗口的所有離子進(jìn)行高速的碎裂、掃描和檢測,理論上可獲取所有離子的碎片信息。DIA蛋白質(zhì)組學(xué)就是利用基于DIA采集模式的質(zhì)譜技術(shù)對蛋白質(zhì)組學(xué)進(jìn)行研究,SWATH是最常見的一種DIA蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù), SWATH技術(shù)具有高通量和高精準(zhǔn)度的優(yōu)勢,可以對大規(guī)模的、復(fù)雜的混合蛋白樣本中的所有組分進(jìn)行精確的定量鑒定。?
iTRAQ即相對定量和絕對定量等壓標(biāo)簽,是一種基于DIA數(shù)據(jù)依賴性采集模式的定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù),該技術(shù)采用同位素標(biāo)簽標(biāo)記蛋白質(zhì),再進(jìn)行后續(xù)的質(zhì)譜分析,一次實(shí)驗可同時對多達(dá)8種蛋白質(zhì)進(jìn)行相對定量分析,用已知濃度的內(nèi)標(biāo)肽還可以將相對定量數(shù)值轉(zhuǎn)化為絕對定量數(shù)值,實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)的絕對定量。?
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