22-NBD膽固醇(NBD cholesterol;CAS:78949-95-8)
22-NBD膽固醇是膽固醇的熒光類似物,含有熒光硝基苯并惡二唑(NBD)基團(tuán)。它已被用于各種體外和體內(nèi)應(yīng)用,包括類固醇攝取和酯化分析、細(xì)胞內(nèi)定位和靶向、哺乳動(dòng)物和細(xì)菌細(xì)胞的代謝以及倉(cāng)鼠腸道對(duì)膽固醇的吸收。當(dāng)摻入 1,2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-3-PC囊泡中時(shí),22-NBD 膽固醇的激發(fā)/發(fā)射最大值分別為 472/540 nm。22-NBD膽固醇的最大排放值是溶劑依賴性的,并隨著溶劑極性的增加而增加。
22-NBD膽固醇理化性質(zhì)
中文名:22-NBD膽固醇;
英文名:22-NBD cholesterol;NBD-cholesterol;
CAS號(hào):78949-95-8
結(jié)構(gòu)式:C[C@H](CNC1=CC=C(C2=NON=C12)[N+](=O)[O-])[C@H]3CC[C@@H]4[C@@]3(CC[C@H]5[C@H]4CC=C6[C@@]5(CC[C@@H](C6
分子式:C28H38N4O4
分子量:494.6g/mol
閃點(diǎn) :347.2±34.3 °C
沸點(diǎn) :650.5±65.0 °C at 760 mmHg
密度 :1.3±0.1 g/cm3
蒸汽壓 :0.0±2.0 mmHg at 25°C
溶解度:Methanol: 1 mg/ml;DMF: 1 mg/ml;DMSO: 0.25 mg/ml
性狀:Solid,power
儲(chǔ)藏條件:-20° C,避光防潮密閉干燥。
?運(yùn)輸條件:2~8℃運(yùn)輸
22-NBD膽固醇應(yīng)用案例
活細(xì)胞高爾基體的熒光標(biāo)記:步驟如下。
1.去除細(xì)胞培養(yǎng)液,用適量的溶液如 HBSS/HEPES 或其他緩沖液來(lái)洗滌生長(zhǎng)在蓋玻片上的細(xì)胞。
2.去除洗滌液,加入新鮮配制的 NBD膽固醇 工作液(5μM),4℃孵育30min。
3.吸走染色液,用冰浴預(yù)冷的細(xì)胞培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞3次左右,換新鮮培養(yǎng)液37℃再孵育30min。
4.用新鮮培養(yǎng)液再洗滌一次,隨后用熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡進(jìn)行觀察。此時(shí)可觀察到高爾基體呈明亮的強(qiáng)熒光染色,而細(xì)胞內(nèi)的其他膜系統(tǒng)呈比較微弱的熒光染色。
光譜圖: