甲基化分析方法
蛋白甲基化是真核和原核生物中常見的翻譯后修飾方式,常發(fā)生在組蛋白和非組蛋白如轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子、細(xì)胞信號(hào)通路分子以及腫瘤抑制蛋白等蛋白分子上。甲基化分析的主要任務(wù)就是鑒定蛋白是否發(fā)生甲基化、發(fā)生甲基化的氨基酸位點(diǎn)以及甲基化的水平。
目前,蛋白甲基化分析方法主要有高效液相串聯(lián)質(zhì)譜法和抗體法。質(zhì)譜法憑借其高通量、高精度和高準(zhǔn)確性等優(yōu)勢(shì)已成為當(dāng)前蛋白甲基化分析的重要工具,大致分析流程是先將待測(cè)蛋白進(jìn)行水解,消化成小分子肽段,再進(jìn)行甲基化肽段的富集,利用串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)經(jīng)高效液相分離后的甲基化肽段,最后將質(zhì)譜數(shù)據(jù)結(jié)合生物信息學(xué)分析對(duì)甲基化位點(diǎn)等信息進(jìn)行解析。
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