基因工程名詞解釋
1、限制性內(nèi)切酶?
可以識(shí)別并附著特定的核苷酸序列,并對(duì)每條鏈中特定部位的兩個(gè)脫氧核糖核苷酸之間 的磷酸二酯鍵進(jìn)行切割的一類酶,簡(jiǎn)稱限制酶。
2、粘性末端
限制酶在識(shí)別序列進(jìn)行交錯(cuò)切割。結(jié)果形成兩條單鏈末端,這種末端的核苷酸順序是互 補(bǔ)的,可形成氫鍵,簡(jiǎn)稱黏端。
3、回文序列
指的是雙鏈 DNA 或 RNA 分子中的特定的核苷酸片段,該片段在其中一條鏈上按 5'到 3'讀取的序列與其互補(bǔ)鏈上按相同的 5'到 3'讀取的序列一致。
4、星號(hào)活性?
也稱星活性,同一類限制性內(nèi)切酶在某些反應(yīng)條件變化時(shí)酶的專一性發(fā)生改變,例如酶 濃度過高、反應(yīng)液離子強(qiáng)度過低、PH 改變、反應(yīng)液中 Mg2* 被 Mnt 代替有機(jī)溶劑影 響時(shí)等,酶切割位點(diǎn)專一性發(fā)生改變。
5、同裂酶
有一些來源不同的限制酶識(shí)別的是同樣的核苷酸靶子序列。?
6、同尾酶?
切割不同的 DNA 片段但產(chǎn)生相同的粘性末端的一類限制性內(nèi)切酶。
7、DNA 指導(dǎo)的 DNA 聚合酶
以親代 DNA 為模板,催化底物 dNTP 分子聚合形成子代 DNA 的一類酶。?
8、Taq 聚合酶?
是一種具有熱穩(wěn)定性的 DNA 聚合酶,最初從水生嗜熱菌(Thermus aquatics)中分離,現(xiàn) 主要通過異源表達(dá)方式制備。
9、pfu-DNA 聚合酶
一類具備 3’-5’DNA 外切酶活性的具有熱穩(wěn)定性的 DNA 聚合酶,可以對(duì) PCR 產(chǎn)物進(jìn)行 校正,因此產(chǎn)物變異率極低。
10、DNA 連接酶
催化兩個(gè)核酸分子的 3’羥基和 5’磷酸基團(tuán)形成磷酸二酯鍵的酶。
11、質(zhì)粒(plasmid)
存在于許多細(xì)菌以及酵母菌等生物中,是細(xì)胞染色體外能夠自主復(fù)制的很小的環(huán)狀 DNA 分子。
12、AmpR、KanR
氨芐青霉素抗性基因、卡那霉素抗性基因
13、原核生物質(zhì)粒復(fù)制起點(diǎn)(ori)
發(fā)生復(fù)制的單個(gè) DNA 單元稱為復(fù)制子(repli—con)。每個(gè)復(fù)制子在每次細(xì)胞分裂期間只 發(fā)動(dòng)一次復(fù)制事件。復(fù)制子有控制啟動(dòng)復(fù)制的元件,稱為復(fù)制起點(diǎn)(origin of replication)。?
14、開放閱讀框(ORF)
從 mRNA 5'端起始密碼子 AUG 到 3'端終止密碼子之間的核苷酸序列,各個(gè)三聯(lián)體密碼 連續(xù)排列編碼一個(gè)蛋白質(zhì)多肽鏈,稱為開放閱讀框架。?
15、LacZ
β-半乳糖苷酶基因。
16、LacZΔM15 型 E.coli?
β-半乳糖苷酶基因缺失 11-41 位氨基酸的大腸桿菌。
17、LacZ’型 plasmid
攜帶β-半乳糖苷酶基因前半部分多肽的質(zhì)粒。
18、LacI
β-半乳糖苷酶/乳糖操縱子調(diào)控基因,用于組成型表達(dá)乳糖操縱子阻遏蛋白。
19、多克隆位點(diǎn)(MCS):
多個(gè)限制酶的單一切點(diǎn),由許多酶切位點(diǎn)組成,往往是人工合成的一段外源基因的插入 部位的 DNA 序列。
20、IPTG
乳糖結(jié)構(gòu)類似物,可與乳糖操縱子的阻遏蛋白結(jié)合,達(dá)到去阻遏效果。
21、X-Gal?
乳糖結(jié)構(gòu)類似物,可作為半乳糖苷酶催化底物。
22、藍(lán)白斑篩選(Blue-White Screening)
藍(lán)白斑篩選是重組子篩選的一種方法,是根據(jù)載體的遺傳特征篩選重組子,主要為α- 互補(bǔ)與抗生素基因。藍(lán)白斑篩選在指示培養(yǎng)基上,未轉(zhuǎn)化質(zhì)粒的菌落因無抗生素抗性而 不能生長(zhǎng),重組質(zhì)粒的菌落是白色的,非重組質(zhì)粒的菌落是藍(lán)色的,以顏色不同為依據(jù)直接篩選重組克隆的方法。?
23、啟動(dòng)子(promoter)
啟動(dòng)子是 RNA 聚合酶識(shí)別、結(jié)合和開始轉(zhuǎn)錄的一段 DNA 序列。
24、終止子(terminator T)
終止子是轉(zhuǎn)錄的終止控制元件,是基因末端一段特殊的序列,它使 RNA 聚合酶在模板 上的移動(dòng)減慢,停止 RNA 的合成。
25、T7 噬菌體啟動(dòng)子(T7 promoter)
用于大腸桿菌 BL21 高效表達(dá)異源蛋白。?
26、核糖體結(jié)合位點(diǎn)(RBS):?
即核蛋白體結(jié)合位點(diǎn)是細(xì)胞 mRNA 的一個(gè)序列,它包括蛋白質(zhì)合成起始期被 30S 亞基結(jié) 合的一個(gè)起始密碼子。
27、SD 序列
mRNA 中用于結(jié)合原核生物核糖體的序列,SD 序列+ATG=RBS。?
28、6×his
連續(xù)的 6 個(gè)組氨酸,蛋白純化標(biāo)簽,可以與鎳親和層析。?
29、AT 克隆?
利用 PCR 產(chǎn)物末端的單鏈 A 和 T 載體兩端的單鏈 T 完成快速互補(bǔ)配對(duì)的載體構(gòu)建方法。 30、α互補(bǔ)
等位基因互補(bǔ),指同源染色體上兩個(gè)不同突變位點(diǎn)形成反式構(gòu)象,即在兩條染色體上分 別發(fā)生一次突變,且突變的位置不同時(shí),生物體能產(chǎn)生正?;蚪普1硇偷默F(xiàn)象。
31、TetR?
四環(huán)素抗性基因。
32、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)
是利用 DNA 片段旁側(cè)兩個(gè)短的單鏈引物,在體外快速擴(kuò)增特異 DNA 片段的技術(shù)。
33、Tm 值
解鏈溫度、模板和引物結(jié)合一半時(shí)的溫度。
34、primer?
DNA 復(fù)制引物。?
35、雙脫氧法測(cè)序(Sanger 測(cè)序)
Sanger 法是根據(jù)核苷酸在某一固定的點(diǎn)開始,隨機(jī)在某一個(gè)特定的堿基處終止,并且在每個(gè)堿基后面進(jìn)行熒光標(biāo)記,產(chǎn)生以 A、T、C、G 結(jié)束的四組不同長(zhǎng)度的一系列核苷酸, 然后在尿素變性的 PAGE 膠上電泳進(jìn)行檢測(cè),從而獲得可見 DNA 堿基序列的一種方法。
36、ddNTP?
雙脫氧核糖核苷酸。
37、EB:?
溴化乙錠。
38、dNTP?
脫氧核糖核苷酸。
39、轉(zhuǎn)化(transformation)
是某一基因型的細(xì)胞從周圍介質(zhì)中吸收來自另一基因型的細(xì)胞的 DNA 而使它的基因型 和表現(xiàn)型發(fā)生相應(yīng)變化的現(xiàn)象。?
40、感受態(tài)細(xì)胞
細(xì)胞最易接受外源 DNA 的狀態(tài)。
41、southern 印跡雜交(Southern blot)
利用 DNA 和 DNA 之間的相互作用對(duì)核酸進(jìn)行研究的實(shí)驗(yàn)方?
42、Northern 印跡雜交(Northern blot)
利用 DNA 和 RNA 之間的相互作用對(duì)核酸進(jìn)行研究的實(shí)驗(yàn)方法
43、western 印跡雜交(western blot)
利用蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)之間的相互作用對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行研究的實(shí)驗(yàn)方法