01?刺激劑量

自體CD19 CAR-T細胞療法是一種新型的癌癥治療方法，已經(jīng)被批準(zhǔn)用于治療一些血液腫瘤。然而，CAR-T細胞治療的應(yīng)用受到了一些限制，如CAR-T細胞功能的不足和不一致性等問題。這些問題直接影響了CAR-T細胞的治療效果和安全性。

研究人員認為，控制CAR-T細胞的功能和表現(xiàn)可能取決于血液中T細胞樣本和CAR-T細胞之間的相互作用。為了探究這個問題，研究人員使用了aAPC，這是一種合成的抗原呈遞細胞，用于模擬T細胞和CAR-T細胞之間的相互作用。使用aAPC可以精確控制抗CD3/抗CD28的刺激劑量，從而影響CAR-T細胞的功能和表現(xiàn)。

研究人員發(fā)現(xiàn)，在激活T細胞過程中，控制抗原呈遞細胞的刺激劑量是調(diào)節(jié)CAR-T細胞功能和表現(xiàn)的關(guān)鍵因素。通過使用aAPC可以精確控制抗CD3/抗CD28的密度，并深刻地改變CAR-T細胞的表型和功能，從而產(chǎn)生多樣化的CAR-T細胞產(chǎn)品庫。這些發(fā)現(xiàn)為更好地制造CAR-T細胞和提高其治療效果和安全性提供了指導(dǎo)。

此外，研究人員還發(fā)現(xiàn)，不同供體的T細胞樣本可能存在個體差異，對CAR-T細胞功能和表現(xiàn)產(chǎn)生不同的影響。例如，患者來源的T細胞樣本可能存在更多的CD8陽性T細胞，高水平的抗CD3/抗CD28可能會導(dǎo)致CAR-T細胞過度刺激和死亡。為了解決這個問題，研究人員提出了一個預(yù)測模型，只要輸入T細胞血樣表型，就可以輸出特定患者所需要的CAR-T細胞所需的刺激劑量。

02?細胞外囊泡

腫瘤來源的細胞外囊泡（EV）在腫瘤微環(huán)境中發(fā)揮了重要作用。EV攜帶腫瘤表面分子，如腫瘤相關(guān)抗原、PD-L1，可以與T細胞結(jié)合并改變其表型和功能，從而使腫瘤逃避免疫反應(yīng)，促進腫瘤進展。EV和CAR-T細胞之間的相互作用可能會影響基于CAR-T細胞的癌癥免疫療法的效果。

研究人員發(fā)現(xiàn)，EV與CD19 CAR-T細胞的結(jié)合依賴于EV表面抗原。CD19陽性EV與CD19陰性CAR-T細胞的結(jié)合具有高親和力和特異性。在與CD19陽性EV共培養(yǎng)后，CD19陰性CAR-T細胞會被激活并釋放出促炎細胞因子，例如γ干擾素和白介素-2。EV也可能通過激活CAR-T細胞導(dǎo)致其功能障礙，最終導(dǎo)致殺傷能力下降。長期培養(yǎng)實驗證實了CD19陽性EV對CAR-T細胞殺傷活性的影響，表明在與CD19陽性和CD19陽性PDL-1陽性EV一起培養(yǎng)的CD19陰性CAR-T細胞中，細胞毒活性顯著降低。

研究人員還發(fā)現(xiàn)，CD19在EV上的存在導(dǎo)致EV特異性附著到CD19陰性CAR-T細胞上，激活CAR-T細胞并釋放促炎細胞因子。這種激活有助于慢性刺激，上調(diào)基因CTLA-4、LAG3、TIM3和PDCD1LG2，這些基因參與CAR-T細胞的功能成熟和隨后的耗竭。因此，CD19陽性EV對CAR-T細胞功能的影響是一個復(fù)雜的過程，可能涉及多個因素的相互作用。

這些研究結(jié)果提示我們，EV可能是癌癥治療中一個重要的潛在目標(biāo)。進一步的研究可以幫助我們更好地理解EV如何影響CAR-T細胞的功能，以及如何利用這種相互作用來改進CAR-T細胞的治療效果。此外，這些研究結(jié)果還提示我們，需要對CAR-T細胞進行監(jiān)測，以確保它們在治療中的最佳表現(xiàn)。

03?去除LCK蛋白

最近的研究發(fā)現(xiàn)，細胞中的嵌合抗原受體（CAR）不一定需要特定蛋白質(zhì)LCK才能工作。實際上，另一種類似的蛋白質(zhì)FYN和CAR內(nèi)的CD28胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域可以幫助CAR發(fā)揮作用，而沒有LCK的CAR細胞比有LCK的細胞工作得更好。

不同于傳統(tǒng)的CAR-T細胞，這些細胞只通過CAR傳輸信號，而不是通過自己的T細胞受體。這意味著可以使用這種去除LCK的CAR-T細胞（disLCK-CAR-T）來創(chuàng)建同種異體CAR-T細胞，而無需消除T細胞受體。此外，與正常CAR-T細胞相比，這種細胞更類似于活生物體中的記憶細胞，并且具有更少耗盡的表型，從而增加持久性并顯著提高功效。

信號網(wǎng)絡(luò)分析表明，disLCK-CAR-T細胞的變化是由FYN相關(guān)的增殖、生存途徑的增加以及LCK控制的強激活免疫應(yīng)答的減少引起的。總體而言，這項研究提供了增強CAR-T技術(shù)的機會。

04?敲除Lin28蛋白

Lin28蛋白經(jīng)常在各種類型的癌癥細胞中過度表達，它在癌細胞的自我更新中發(fā)揮作用，讓癌癥細胞能夠持續(xù)生長和分裂。它還參與了癌癥干細胞的生成，癌癥干細胞是腫瘤內(nèi)的一小部分細胞，具有自我更新和分化為腫瘤內(nèi)各種細胞類型的能力，被認為是腫瘤生長、抗治療和疾病復(fù)發(fā)的原因。

在這項研究中，研究人員想了解Lin28如何幫助癌癥細胞逃避癌癥的免疫系統(tǒng)。他們重點研究了名為IDO1的蛋白質(zhì)，這種蛋白質(zhì)會產(chǎn)生一種具有免疫抑制作用的分子——犬尿素，可以幫助癌細胞避開免疫系統(tǒng)的檢測，實現(xiàn)免疫逃逸。

研究人員分析了癌癥患者的樣本，發(fā)現(xiàn)Lin28B和IDO1之間存在正相關(guān)。他們還利用計算機建模預(yù)測特定轉(zhuǎn)錄基序（Sox2 /Oct4）作為IDO1的增強子，這意味著它有助于IDO1在癌細胞中更強烈地表達。

為了驗證他們的假設(shè)，研究人員敲除了癌細胞中的Lin28B。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，這降低了Sox2/Oct4的表達，并下調(diào)了IDO1。他們還使用小分子抑制劑C1632阻斷Lin28，并觀察到這也抑制了IDO1的表達，進而又觀察到犬尿氨酸的產(chǎn)生也隨之減少。此外，研究人員還發(fā)現(xiàn)Lin28軸的抑制會損害癌癥細胞中PD-L1的表達。

研究人員測試了調(diào)節(jié)Lin28對免疫細胞（GPC3-CAR T和NK細胞）體外抗肝癌細胞的細胞毒性的影響，并在癌癥小鼠模型中進行了測試。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，阻斷Lin28可以增強這些免疫細胞殺死癌癥細胞的能力，有助于提高免疫治療的效果。

總的來說，這項研究的結(jié)果表明，抑制Lin28可能是增強免疫系統(tǒng)抗擊癌癥能力的有效策略。通過阻斷Lin28，能夠減少癌細胞上IDO1和PD-L1的表達，使得癌癥細胞更容易受到免疫攻擊，并提高某些免疫細胞殺死癌癥細胞的效率。

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