Kamiya艾美捷小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白ELISA預(yù)期用途：

小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白ELISA是一種高靈敏度的雙位點酶聯(lián)免疫分析（ELISA）小鼠生物樣品中轉(zhuǎn)鐵蛋白的測定。僅供研究使用。

引言

轉(zhuǎn)鐵蛋白是一種金屬結(jié)合蛋白，可逆地與血漿中的酸溶性鐵結(jié)合。它的功能是運輸鐵到骨髓和組織儲存器官，如肝臟。轉(zhuǎn)鐵蛋白也參與調(diào)節(jié)和控制鐵的吸收并防止鐵中毒。與觸珠蛋白一樣，血紅蛋白的載體，轉(zhuǎn)鐵蛋白是在肝臟中合成，但與觸珠蛋白不同，轉(zhuǎn)鐵蛋白在卸載鐵后返回循環(huán)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)。該ELISA可用于測量血清，組織提取物和其他生物制劑中的轉(zhuǎn)鐵蛋白流體。

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Kamiya艾美捷小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白ELISA原理：

在該測定中，轉(zhuǎn)鐵蛋白存在于樣品與吸附在聚苯乙烯微量滴定表面的抗轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體反應(yīng)

井。通過洗滌除去未結(jié)合的蛋白質(zhì)后，與辣根綴合的抗轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體加入過氧化物酶（HRP）。該HRP綴合的抗體與先前結(jié)合的轉(zhuǎn)鐵蛋白形成復(fù)合物。在另一個洗滌步驟之后，通過添加顯色劑來測定與免疫吸附劑結(jié)合的酶底物，3,3'，5,5'-TMB。結(jié)合酶的數(shù)量與濃度成正比測試樣品中的轉(zhuǎn)鐵蛋白；因此，在450nm處的吸光度是轉(zhuǎn)鐵蛋白濃度的量度測試樣本。測試樣品中轉(zhuǎn)鐵蛋白的量可以從由校準(zhǔn)品，并針對樣品稀釋進(jìn)行校正。

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Kamiya艾美捷小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白ELISA試劑制備：

1.稀釋劑濃縮物

提供的稀釋劑溶液是5倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水1:5稀釋。

2.洗滌液濃縮物

提供的洗滌溶液是20倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水按1:20稀釋。水晶當(dāng)儲存溫度低時，濃縮物中的形成并不少見。將濃縮物升溫至稀釋前30-35°C可溶解晶體。

3.酶-抗體綴合物濃縮物

通過添加10μL計算每個微量滴定板測試條所需的工作共軛溶液量對于用于測試的每個測試條，酶-抗體與990μL1X稀釋劑綴合。均勻，但輕輕混合。避免起泡。使用前立即稀釋并避光。

4.TMB底物溶液

隨時可用。

5.微量滴定板

隨時可用。密封微量滴定袋并從袋中取出板。去除所有會不用于測定并放回袋中并與干燥劑一起重新密封。

7.小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白校準(zhǔn)器

向凍干的小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白校準(zhǔn)品中加入1.0 mL蒸餾水或去離子水，輕輕混合直至溶解。校準(zhǔn)器現(xiàn)在的濃度為8.70μg/mL（重組校準(zhǔn)器應(yīng)等分并如果打算將來使用，則凍結(jié)）。在每個步驟之間充分混合。避免起泡。

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