重組蛋白疫苗是一類不包含完整病原體，并由異源表達(dá)系統(tǒng)中生產(chǎn)的特定蛋白質(zhì)抗原配制而成的一類疫苗。常見的異源表達(dá)系統(tǒng)有：細(xì)菌、哺乳動(dòng)物細(xì)胞、植物細(xì)胞和昆蟲細(xì)胞等，往往需要根據(jù)所生產(chǎn)的抗原種類選擇合適的異源表達(dá)系統(tǒng)。重組蛋白疫苗由于其具有安全性好、穩(wěn)定性強(qiáng)以及成本較低等幾大優(yōu)勢，近年來也受到研究者們的廣泛青睞。目前，重組蛋白疫苗已被廣泛應(yīng)用于多種傳染病，如預(yù)防乙型病毒性肝炎（即乙肝）、破傷風(fēng)、百日咳、流行性感冒等等。重組蛋白疫苗結(jié)構(gòu)的理解對(duì)于了解其功能和穩(wěn)定性至關(guān)重要。

重組蛋白疫苗的活性成分為重組蛋白質(zhì)，這些蛋白質(zhì)的序列與結(jié)構(gòu)特性直接影響疫苗的免疫原性和效果。N端序列，即蛋白質(zhì)的氨基末端序列，是重組蛋白質(zhì)的重要特性之一。對(duì)其進(jìn)行分析可以幫助確認(rèn)重組蛋白質(zhì)是否正確地被表達(dá)和修飾，因此對(duì)于疫苗的質(zhì)量控制至關(guān)重要。目前，N端測序通常使用Edman降解法進(jìn)行。這種方法是通過連續(xù)的化學(xué)反應(yīng)，逐個(gè)去除抗體的N端氨基酸，并對(duì)每個(gè)去除的氨基酸進(jìn)行識(shí)別。這個(gè)過程可以重復(fù)進(jìn)行，直到得到足夠長的氨基酸序列。然而，這種方法比較耗時(shí)，并且需要足夠大量的抗體樣品。

生物制品表征N端測序示意圖

除了Edman降解法，質(zhì)譜技術(shù)（尤其是串聯(lián)質(zhì)譜）也被廣泛用于重組蛋白疫苗的氨基酸序列分析，質(zhì)譜法將抗體蛋白消化成5-25個(gè)氨基酸的肽，隨即通過LC-MS/MS分析檢測，將采集的數(shù)據(jù)與理論序列數(shù)據(jù)庫進(jìn)行匹配，進(jìn)而確認(rèn)N端序列。質(zhì)譜可以測出封閉和修飾的重組蛋白疫苗N末端，且已成為首選的全長抗體測序方法。Edman降解法與質(zhì)譜法不同，其不需要借助蛋白數(shù)據(jù)庫便可以直接進(jìn)行序列分析。但它不能用于N-末端封閉或修飾后的氨基酸殘基。

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