小鼠小膠質(zhì)細胞(BV2)細胞培養(yǎng)要點
BV2小鼠小膠質(zhì)細胞,來源于1990年,應(yīng)用攜帶癌基因v-raf/v-myc的反轉(zhuǎn)錄病毒J2感染原代培養(yǎng)的小鼠小膠質(zhì)細胞而獲得的永生細胞系。免疫組化結(jié)果顯示BV2為MAC1、MAC2陽性,而MAC3、膠質(zhì)細胞原纖維酸性蛋白、半乳糖腦苷脂為陰性。且是高度純化的永生細胞系,同時該細胞系具備了原代培養(yǎng)的小膠質(zhì)細胞的形態(tài)學(xué)、表型以及各項功能特點,相較于原代培養(yǎng)的細胞而言,永生化的細胞系培養(yǎng)起來更為容易。因此目前被廣泛的運用于科研究當(dāng)中。

細胞簡稱:BV2
產(chǎn)品貨號:TCM-C718
種屬來源:小鼠
組織來源:腦
細胞形態(tài):多形型
生長特性:半貼壁半懸浮生長
培養(yǎng)體系:DMEM-H+10%FBS+1%P/S
配套培養(yǎng)基貨號:TCM-G718
傳代比例:1:3-1:6,每2-3天換液一次
傳代周期:48-72 h
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%CO2,溫度:37℃
凍存條件:60%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+30%FBS+10%DMSO,液氮儲存
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BV2細胞特性
多形型細胞,半貼壁半懸浮生長,因此它的形態(tài)是不規(guī)則的,存在圓形和梭形兩種形態(tài)。圓形的多為懸浮形態(tài),細胞狀態(tài)良好時邊緣光滑、折光度高,貼壁細胞則既有圓形也有梭形,有短觸角或凸起伸出。但如果出現(xiàn)大量細胞脫壁或完全呈現(xiàn)貼壁形態(tài)的情況都應(yīng)引起重視,及時反思培養(yǎng)過程,看是否存在問題。

BV2細胞注意事項
1.BV2細胞對培養(yǎng)條件較敏感,當(dāng)培養(yǎng)基出現(xiàn)過酸或者過堿的情況時都會出現(xiàn)脫壁現(xiàn)象,尤其是在培養(yǎng)基過堿時,會出現(xiàn)快速脫壁的現(xiàn)象。因此在培養(yǎng)過程中需關(guān)注細胞培養(yǎng)基的酸堿度,當(dāng)培養(yǎng)基顏色呈現(xiàn)粉紫色時,PH值大概率偏高,需及時收集培養(yǎng)皿中的懸浮細胞,進行離心換液,更換為新鮮的完全培養(yǎng)基。若使用的是培養(yǎng)瓶,應(yīng)注意瓶口是否為透氣瓶口,若不是帶有透氣口的款式,在使用時應(yīng)擰松瓶口,保證瓶內(nèi)CO2濃度為細胞正常生長所需濃度。
2.BV2細胞在培養(yǎng)過程中也會出現(xiàn),圓形懸浮形態(tài)的越來越少,有觸角的貼壁形態(tài)越來越多的情況。這種狀況的出現(xiàn)往往也伴隨著細胞增殖越來越慢甚至是停止生長的現(xiàn)象。這是因為相較于梭形細胞,圓形細胞的增值速度較快,因此在圓形細胞數(shù)量減少的情況下就會伴隨出現(xiàn)增殖緩慢的情況。BV2為半貼壁半懸浮細胞,而圓形細胞大多數(shù)為懸浮形態(tài),因此在換液及傳代時應(yīng)將細胞懸液收集,降低圓形細胞的損失。
3.BV2細胞易出現(xiàn)分化現(xiàn)象,分化后的細胞貼壁更牢,極難消化,因此應(yīng)盡量縮短消化時間,預(yù)防細胞分化。若已經(jīng)出現(xiàn)嚴重分化的情況,則可以嘗試通過輕柔的吹打?qū)⒉糠旨毎迪聛?,并懸浮細胞一起收集,無法吹打下來的細胞直接舍棄,從而降低細胞的分化程度。但吹打時也要切記,不可暴力吹吸,避免對細胞造成機械刺激。
總體來說,細胞的狀態(tài)與其生長環(huán)境以及培養(yǎng)方式息息相關(guān),在培養(yǎng)過程中應(yīng)按規(guī)程處理細胞,時時關(guān)注細胞的狀態(tài),如遇問題,及時調(diào)整。

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