大鼠同種異體骨肉瘤骨內(nèi)原位移植模型【疾病動(dòng)物模型】

【造模機(jī)制】幼年期（<6周齡）大鼠免疫功能尚未完善，做大鼠骨肉瘤細(xì)胞株（UMR106或 ROCL-Am831）同種異體骨內(nèi)原位移植，腫瘤細(xì)胞在缺乏有效免疫監(jiān)視的條件下發(fā)生逃逸生長(zhǎng)，也可以獲得很高的成功率。

【模型特點(diǎn)】瘤細(xì)胞植入骨內(nèi)后3周,骺端出現(xiàn)膨大，瘤區(qū)皮下可見(jiàn)豐富的迂曲小血管;切面可見(jiàn)骨皮質(zhì)破壞斷裂，腫瘤侵及軟組織，腔內(nèi)外的腫瘤呈魚(yú)肉狀；移植后4周，骺端球形膨大，腫塊直徑可達(dá)2～3cm大小，質(zhì)中或稍硬，骨皮質(zhì)破壞更明顯；肺門及邊緣有少量轉(zhuǎn)移灶，大小不等（直徑0.1~0.3cm）；移植后6周，腫瘤呈巨球形，質(zhì)稍硬；切面骺端骨皮質(zhì)已消失，僅見(jiàn)骨干殘端；雙肺見(jiàn)大量轉(zhuǎn)移瘤，大小不等，部分瘤灶融合，灰白色；動(dòng)物飲食減少，明顯消瘦，精神委靡，有惡病質(zhì)產(chǎn)生；移植后7周，右下肢腫瘤直徑可達(dá) 3～5cm,雙肺廣泛轉(zhuǎn)移灶，瘤灶融合，正常肺組織結(jié)構(gòu)基本消失。模型鼠自然生存期約7周左右。光鏡下瘤細(xì)胞彌漫性生長(zhǎng)，細(xì)胞體積大，大小不一，深染，核圓形或卵圓形，核漿比例大，核仁清晰可見(jiàn)，病理性核分裂象多，細(xì)胞間質(zhì)少，呈肉瘤特性；肺部轉(zhuǎn)移灶瘤細(xì)胞與髓腔腫瘤形態(tài)結(jié)構(gòu)一致，也可見(jiàn)腫瘤內(nèi)部有大片壞死，骨基質(zhì)鈣鹽沉積及腫瘤侵犯關(guān)節(jié)軟骨現(xiàn)象。2~7周后血清堿性磷酸酶（ALP）水平模型鼠均高于正常鼠。

【造模方法】將由液氮保存的大鼠骨肉瘤細(xì)胞系 UMR 106 取出復(fù)蘇后進(jìn)行體外培養(yǎng),傳代增殖，得到對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的骨肉瘤細(xì)胞備用。造模取30~40天齡 Wistar 大鼠，雌雄各半，鹽酸氯胺酮注射液肌內(nèi)注射麻醉(0.1g/kg)，碘酒酒精消毒下肢。在脛骨上部干骺端內(nèi)側(cè)或股骨下端外側(cè)作切口，分離皮下組織暴露骨面后，用直徑1mm克氏針輕柔鉆入骨髓腔（有明顯落空感），然后用12號(hào)輸血針頭沿此孔斜鉆入髓腔，挖取其中骨髓和松質(zhì)骨，形成一傾斜通道。用無(wú)血清 RPNM-1640培養(yǎng)液將備用骨肉瘤細(xì)胞稀釋成 5×10°/ml,每個(gè)骨髓腔內(nèi)注射 0.2ml,骨蠟封口，依次縫合肌膜、皮膚，消毒切口后包扎，送回籠中飼養(yǎng)觀察，4周即可造模成功。

【應(yīng)用范圍】與裸鼠荷人成骨肉瘤骨髓腔原位移植模型應(yīng)用范圍相同。

【注意事項(xiàng)】動(dòng)物年齡越小，其免疫功能越不健全，在理論上造模成功率就越高，但動(dòng)物年齡太?。?lt;2周齡），不能耐受手術(shù)損傷，移植后死亡率較高。

【模型評(píng)價(jià)】本模型的成功率較裸鼠荷瘤模型略低（80%~90%），但由于其實(shí)驗(yàn)周期短，動(dòng)物成本低，便于管理飼養(yǎng)而被廣泛應(yīng)用。

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