小鼠40S核糖體蛋白S14（RPS14）ELISA試劑盒是Abbexa公司非常暢銷(xiāo)的一款產(chǎn)品。Abbexa致力于為生命科學(xué)、藥物開(kāi)發(fā)和生物技術(shù)領(lǐng)域的科學(xué)家和研究者提供zui佳的客戶體驗(yàn)和高質(zhì)量的產(chǎn)品。產(chǎn)品涵蓋一抗、二抗、蛋白質(zhì)、ELISA試劑盒、酶以及其他用于研究的試劑盒和工具。

Abbexa小鼠40s核糖體蛋白s14(RPS14)ELISA試劑盒運(yùn)用雙抗夾心ELISA法定量測(cè)定血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其他生物液體中(RPS14)含量。

一、使用注意事項(xiàng)

1．酶標(biāo)板袋拆封后，盡快將不用的板孔放回，并放入干燥劑，保持酶標(biāo)板干燥。

2．用戶在初次使用試劑盒時(shí)，應(yīng)將試劑盒平衡至室溫，各種試劑管離心數(shù)分鐘，以便試劑集中到管底。

3，TMB A液避光保存。

4，洗板過(guò)程非常重要，不充分的洗板易導(dǎo)致假陽(yáng)性。

5．建議所有標(biāo)準(zhǔn)品、樣本都做雙份檢測(cè)。

6．請(qǐng)保持試驗(yàn)過(guò)程的連續(xù)性，禁止酶標(biāo)板干燥，因干燥會(huì)使酶標(biāo)板上的生物成分迅速失活。

7．為避免交叉污染，要避免重復(fù)使用手中的吸頭和試管。

8．禁止混用不同批次試劑盒內(nèi)的試劑。

二、試驗(yàn)所需自備物品

1. 酶標(biāo)儀(450nm波長(zhǎng)濾光片)

2. 37℃恒溫箱，雙蒸水或去離子水

3. 自動(dòng)洗板機(jī)

4. 高精度移液器， EP管及一次性吸頭： 0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL

5. 吸水紙

三、洗板方法

手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將推薦的PBt或TBT洗滌緩沖液 至少 0.3ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要，重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。

自動(dòng)洗板：如果有自動(dòng)洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。

四、樣品收集

1.血清：全血樣品于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，收集血液的試管應(yīng)為一次性的無(wú)熱原，無(wú)內(nèi)毒素試管。

2.血漿：抗凝劑推薦使用EDTA或肝素，樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測(cè)。避免使用溶血，高血脂樣品。

3.組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。然后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測(cè)。

4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：取細(xì)胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘，除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清檢測(cè)。

5.其它生物樣品：1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)

6.樣品應(yīng)清澈透明，懸浮物應(yīng)離心去除。

7.樣品收集后若在1周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的可保存于4℃，若不能及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次使用量分裝，凍存于-20℃(1個(gè)月內(nèi)檢測(cè))，或-80℃（6個(gè)月內(nèi)檢測(cè)），避免反復(fù)凍融。

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