一.我是做農(nóng)藥殘留分析的，不同的基質(zhì)雜質(zhì)含海量是不同的，我用C18分析時(shí)有可能一次就污染了，我用高流速，和反向沖洗都解決不了，是不是這根柱子就廢了，有沒(méi)有其他的辦法？

? ? ? ?答：高流速反向沖洗是對(duì)的，關(guān)鍵你用了什么溶劑沖洗呢？用原來(lái)的流動(dòng)相沖洗肯定不管用，要不然就不會(huì)累積在柱子上了。你應(yīng)該用流動(dòng)相中的強(qiáng)溶劑B沖洗，如果不行，就需要啟用再生的程序，當(dāng)然再生時(shí)用的溶劑更強(qiáng)。

? ? ? ?100％甲醇---100％乙晴---75％乙晴/25％異丙醇---100％異丙醇---100％二氯甲烷---100％正己烷。用每種溶劑沖洗至少10個(gè)柱體積，對(duì)于250mm×4.6mm的分析柱，合適的沖洗流速是1～2ml/min。最后用10柱體積的異丙醇過(guò)渡，然后回到原來(lái)的流動(dòng)相體系。

? ? ? ?再生還不解決問(wèn)題，最后一招就是挖補(bǔ)柱頭填料，把柱頭污染的填料挖掉，用干凈填料填補(bǔ)進(jìn)去。挖補(bǔ)填料，破壞原有柱床結(jié)構(gòu)，挖補(bǔ)后柱效也不可能有新柱水平，或許能再維持一段時(shí)間，但不會(huì)長(zhǎng)久。

二.還有溶劑中的金屬過(guò)濾頭生銹了，會(huì)有什么影響？會(huì)不會(huì)影響到柱子的壽命，金屬離子和柱子有沒(méi)有什么反應(yīng)？

? ? ? ?答：我覺(jué)得你就把銹當(dāng)成顆粒物污染的一種，會(huì)導(dǎo)致拖尾、柱壓上升等。溶解的金屬離子一般在反相柱上沒(méi)有什么保留能力，馬上就會(huì)被沖出柱子，不會(huì)和固定相或者和硅膠基質(zhì)反應(yīng)。

三.如果在溶劑過(guò)濾時(shí)把水膜當(dāng)成有機(jī)膜了溶解了而且這樣的溶劑又做有機(jī)相用了，造成C18柱壓由1000升到3000，流動(dòng)相是乙腈和水，問(wèn)一下這樣的柱子還能用么？有沒(méi)有什么補(bǔ)救方法？

? ? ? ?答：溶解的膜作為了顆粒物堵塞篩板，引起柱壓上升，也只有反沖一下，如果能把堵在篩板上的膜殘?jiān)鼪_走，柱壓下降了就OK了；如果殘?jiān)M(jìn)入了柱子內(nèi)部的填料間隙，會(huì)難沖一點(diǎn)，也只能多沖一會(huì)吧，實(shí)在不行，你又舍不得把色譜柱報(bào)廢，就只有挖補(bǔ)柱頭填料和換篩板了。

四.保護(hù)柱和預(yù)柱的作用是不是一樣的，如果不一樣有什么區(qū)別么？保留時(shí)間漂移多少為可以接受的范圍？

? ? ? ?答：保護(hù)柱一般帶填料，相當(dāng)于一根縮短了的色譜柱（一般是1-2cm長(zhǎng)度），卡套里可更換的柱芯，柱管、篩板和填料都有。保護(hù)柱里的柱芯好像是在前面開(kāi)路的掃雷部隊(duì)，流動(dòng)相和樣品里如有什么損害柱子的污染物，保護(hù)柱就自己承受了下來(lái)。

? ? ? ?而預(yù)柱，現(xiàn)在一般指的就是接在進(jìn)樣器和色譜柱之前的在線過(guò)濾器。在線過(guò)濾器和保護(hù)柱的最大區(qū)別是不帶填料，只有可更換的篩板。預(yù)柱只能保護(hù)色譜柱免受顆粒物質(zhì)的污染，而不能阻擋溶解在流動(dòng)相中的強(qiáng)保留物質(zhì)。

? ? ? ?保留時(shí)間是液相色譜中一個(gè)很有用的診斷分離問(wèn)題的工具。保留時(shí)間受流動(dòng)相組成、溫度、pH、流速、固定相流失和柱老化等很多因素的影響，如果所有這些參數(shù)保持不變，保留時(shí)間也保持恒定。但在實(shí)際操作中，不可能對(duì)每個(gè)色譜參數(shù)進(jìn)行很完美的控制，如即便加了柱溫箱，溫度還是會(huì)有波動(dòng)；流動(dòng)相組成會(huì)因組分揮發(fā)性不同而改變。

? ? ? ?所以保留時(shí)間有上下0.02-0.05min的變動(dòng)是非常正常的，對(duì)某些方法有0.1min上下變動(dòng)也屬正常。保留時(shí)間有大的變化，預(yù)示著系統(tǒng)和方法存在問(wèn)題。流路里有氣泡存在，泵閥有泄漏，會(huì)因流量降低而導(dǎo)致保留時(shí)間增加。梯度混合比例閥故障也是保留時(shí)間變化原因之一。

總結(jié)

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