膠原蛋白酶——Worthington四種類(lèi)型的粗膠原酶
膠原蛋白酶,又稱(chēng)骨膠原酶,簡(jiǎn)稱(chēng)膠原酶。由溶組織梭菌(Clostridum histolytirum)制取而得。
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Worthington?已經(jīng)建立了幾種類(lèi)型的粗膠原酶:類(lèi)型?1、2、3?和?4。
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??1?型粗膠原酶具有膠原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性的原始平衡。
??2?型含有較高相對(duì)水平的蛋白酶活性,尤其是梭菌蛋白酶。
??3?型含有最低水平的二級(jí)蛋白酶。
??4?型被設(shè)計(jì)成胰蛋白酶活性特別低,以限制對(duì)膜蛋白和受體的損害。
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艾美捷Worthington無(wú)動(dòng)物型?AFA、AFB?和?AFC、STZ1?和?STZ2膠原蛋白酶源自在完全不含動(dòng)物成分的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的培養(yǎng)物,設(shè)計(jì)用于必須防止引入潛在動(dòng)物源性病原體的生物加工應(yīng)用。二級(jí)蛋白酶的水平與?1?型和?2?型膠原酶相似。
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膠原蛋白酶測(cè)定是Mandl的改進(jìn),其中將膠原酶與天然膠原一起溫育5小時(shí),并使用Moore and Stein, JBC, 176 , 367, (1948)比色茚三酮法測(cè)定膠原分解的程度。釋放的氨基酸以每毫克膠原酶微摩爾亮氨酸表示。
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艾美捷Worthington膠原蛋白酶用途:
粗膠原酶廣泛用于酶促原代細(xì)胞分離和組織解離程序。大多數(shù)研究人員要么使用粗制膠原酶制劑,例如?1、2、3?和?4?型,要么使用色譜純化的膠原酶(代碼:CLSPA);后者通常與二級(jí)酶如彈性蛋白酶、透明質(zhì)酸酶等結(jié)合。為了獲得最佳結(jié)果,必須針對(duì)要解離的組織調(diào)整蛋白水解活性的較精確混合。不同組織的類(lèi)型和有效性之間的相關(guān)性很好,但并不完美,并且可能部分取決于使用參數(shù)和目標(biāo)以及批次間的差異。
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艾美捷Worthington膠原蛋白酶相關(guān)研究:
膠原蛋白?(CL)
脫氧核糖核酸酶?I (DP/D/DCLS/D2/DPFF/DPRF)
彈性蛋白酶?(ES/ESL/ESFF)
透明質(zhì)酸酶?(HSE/HSEP)
中性蛋白酶?(Dispase, NPRO)
木瓜蛋白酶?(PAP/PAPL/PAP2)蛋白酶?K (PROK)
胰蛋白酶?(TL/TRL/TRL3/TRLS/TRTPCK)
胰蛋白酶抑制劑?(LBI/OI/SI/SIC)
細(xì)胞分離優(yōu)化系統(tǒng)?(CIT)
肝細(xì)胞分離系統(tǒng)?(HIS)
新生兒心肌細(xì)胞分離系統(tǒng)?(NCIS)
木瓜蛋白酶解離系統(tǒng)?(PDS/PDS2)