16S/18S/ITS擴增子測序
擴增子測序是對特定長度的PCR產(chǎn)物或者捕獲的片段進行測序,目前主要是應(yīng)用高通量測序技術(shù)對特定環(huán)境中特定遺傳物質(zhì)進行測序。大多數(shù)天然微生物都不能通過傳統(tǒng)的分離培養(yǎng)方法進行分離和克隆,這對于天然微生物定性和定量,探索微生物多樣性是嚴(yán)重的挑戰(zhàn)。擴增子測序可以克服傳統(tǒng)分離培養(yǎng)的弱點,對樣品中的微生物進行定性和定量,目前在微生物多樣性檢測中廣泛應(yīng)用。
16S和18S rDNA是細(xì)菌和真菌中16s或18s rDNA基因的高變區(qū),而ITS(Internal Transcribed Spacer)則是細(xì)菌、真菌和古細(xì)菌中小亞基和大亞基rRNA基因之間的間隔區(qū)DNA。這些特定的遺傳物質(zhì)都包括進化保守性及進化可變區(qū)。由于PCR擴增容易,可以從少量DNA中擴增出來,而基因序列即使在近緣種間也有高度的變異,因而擴增子測序在分類學(xué)和分子系統(tǒng)學(xué)中得到了廣泛的應(yīng)用。
根據(jù)研究目的不同擴增子測序可細(xì)分為如下幾個產(chǎn)品類型:
16S rDNA測序:16S rDNA是編碼16S rRNA的基因,存在于所有細(xì)菌基因組。16S rDNA既能體現(xiàn)不同菌屬之間的差異,又能利用測序技術(shù)較容易地得到其序列,目前被廣泛用于病原菌的檢測和鑒定。16S rRNA的可變區(qū)經(jīng)常用于不同微生物群落的屬或種系統(tǒng)進化分類。
18S rDNA測序:18S rDNA為編碼真核生物核糖體小亞基rRNA的DNA序列。在結(jié)構(gòu)上分為保守區(qū)和高變區(qū),保守區(qū)反映生物物種間的親緣關(guān)系,高變區(qū)反映物種間的差異,18S rDNA在進化速率上相對于ITS更加保守。
ITS測序:在真核生物中,18S rDNA和28S rDNA轉(zhuǎn)錄間隔序列稱為ITS區(qū)。ITS由于是非轉(zhuǎn)錄區(qū),承受的選擇壓力較小,變異強。ITS屬于中度保守區(qū)域,利用它可研究種及種以下的分類階元。

擴增子測序技術(shù)優(yōu)勢:
鑒定效率高:與克隆或培養(yǎng)等傳統(tǒng)鑒定方法相比,微生物群16S/18S/ITS測序是一種更快、更準(zhǔn)確的方法;
雙區(qū)檢測:針對一個或多個可變區(qū)域的靈活性,能夠進行更長的序列讀取,并能夠?qū)溥M行更準(zhǔn)確的分析;
較低的成本:與宏基因組測序相比,對測序深度的要求更低,性價比較高;
高靈敏度:可以鑒定出豐度極低的細(xì)菌。
擴增子測序?qū)嶒灹鞒蹋?/strong>

擴增子測序分析流程:

擴增子測序服務(wù)優(yōu)勢:
經(jīng)驗豐富的技術(shù)人員,可以提供從實驗設(shè)計、樣品檢測、數(shù)據(jù)分析等全套專業(yè)服務(wù);
流程明確,減少不必要的樣品和時間浪費,交付時間短;
不同來源樣本采用不同提取方法和建庫測序策略,滿足多種環(huán)境研究需求;
百泰派克生物科技擁有蛋白組、代謝組等分析平臺,可進行多組學(xué)整合分析,提升文章質(zhì)量。
擴增子測序樣品要求:
樣品類型:Meta樣品,如糞便、土壤等或Meta DNA樣品均可進行檢測。具體要求請咨詢技術(shù)人員。
擴增子測序案例展示:
