培養(yǎng)基制備、平板劃線的注意事項!
生物接種是指將微生物如細菌接種到適合它們生長繁殖的人工培養(yǎng)基上。
因此,制備培養(yǎng)基是我們首先要完成的事情。
制備培養(yǎng)基的過程包括計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。
一,倒平板
1) 培養(yǎng)基滅菌后,需冷卻至50℃左右時才能倒平板。
2) 左手拿培養(yǎng)皿,右手拿錐形瓶,左手拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,不要完全打開。
3) 整個操作在酒精燈火焰旁進行,避免雜菌污染。
4) 平板冷卻后要倒置的原因:防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基,造成污染。
5) 若倒平板時,培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個平板應(yīng)丟棄。
二、平板劃線操作
1)第一次劃線及每次劃線之前都要灼燒滅菌,劃線操作結(jié)束仍需灼燒接種環(huán),每次灼燒目的總結(jié)如下:
??????第一次劃線灼燒:避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)基;
??????第二次劃線之前灼燒:殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種,使每次劃線的菌種來自上次劃線末端。
??????劃線結(jié)束:殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免污染環(huán)境和感染操作者。
2)灼燒接種環(huán)之后,要冷卻后才能伸入菌液,以免溫度太高殺死菌種。
3)劃線時最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連。
4)劃線用力要大小適當,防止用力過大將培養(yǎng)基劃破。
三、稀釋涂布平板
1)稀釋操作時:每支試管及其中9mL水、移液管均需滅菌;操作時,試管口和移液管應(yīng)在離火焰1-2cm處。
2)涂布平板時:
??????① 涂布器用70%酒精消毒,取出時,多余酒精在燒杯中滴盡,沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火焰上引燃。
??????② 不要將過熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯中,以免引燃其中的酒精。
??????③ 酒精燈與培養(yǎng)皿距離要合適,移液管頭不要接觸任何物體。
你猜得出,下面這兩種照片分別對應(yīng)了哪種接種方法嗎?
來源:環(huán)凱轉(zhuǎn)載于“食品微生物檢測”公眾號,作者~lxy。
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