我們了解到，鱟血液中含有一種細(xì)胞即變形細(xì)胞，這種細(xì)胞內(nèi)的溶解物（裂解物tachypleus lysate，TL）可與微量細(xì)菌內(nèi)毒素起凝集反應(yīng)，這是由TL中的一種酶被細(xì)菌（革蘭陰性菌）細(xì)胞壁成分——脂多糖激活，使其蛋白質(zhì)形成凝膠所致。為此人們已闡明了這方面的理論機(jī)制，并已著手利用各種技術(shù)從自然界存在的某些物質(zhì)中把它提取出來，實(shí)踐并應(yīng)用于社會(huì)，鱟變形細(xì)胞內(nèi)的溶解物主要有兩種，凝固蛋白原及凝固蛋白酶原。這兩種物質(zhì)提取后，即為檢測內(nèi)毒素的益試劑，它的檢測靈敏度高低取決于制備擻血細(xì)胞溶解物的質(zhì)量。因此，在制備提取過程中不能有微量的內(nèi)毒素進(jìn)入，所以，鱟試劑的制備提取過程是有相當(dāng)難度的。

一、材料與制備

1、鱟

采用我國東南沿海地區(qū)的鱟即東方鱟（中國鱟），采血量最多為400ml，平均200ml（需根據(jù)體重大小而定），其變形細(xì)胞數(shù)最高為5×1011/L以上，平均為4×1010/L。

2、器材及處理

準(zhǔn)備采血瓶（250ml玻璃瓶）注射器等用具，經(jīng)洗滌后放在重鉻酸鉀與硫酸的清潔液中浸泡過夜，然后用無內(nèi)毒素的流水沖洗3次，晾干后于260℃烤箱內(nèi)烘干3h備用。采血針、管均需用一次性無菌采血器（均無內(nèi)毒素）。

3、試劑配制

以下試劑中凡是固體試劑均需預(yù)先去除內(nèi)毒素，去內(nèi)毒素的方法要視各種試劑的耐熱度而定，一般用80~120℃不間斷烘烤約10h左右。配制試劑用的重蒸餾水應(yīng)不含內(nèi)毒素（小于0.03EU/ml內(nèi)毒素含量）。 抗凝劑1：茶堿（theophylline）2g；磷酸氫二鈉（Na2HPO4·12H2O）2g；氯化鈉40g；無內(nèi)毒素蒸餾水1000ml。

抗凝劑2：茶堿0.36g；磷酸氫二鈉2g；氯化鈉4g；無內(nèi)毒素蒸餾水1000ml。

（3）洗滌液：磷酸氫二鈉2g；氯化鈉40g；無內(nèi)毒素蒸餾水1000ml。 （4）裂解液：將0.05mol/L的三羥甲基氨基甲烷（Tris）用鹽酸調(diào)節(jié)至pH值為7左右，也可加入二價(jià)陽離子如Ca2+、Mg2+、Mn2+等提高靈敏度。