什么是單克隆抗體,什么是多克隆抗體,如何制備單克隆抗體?
單克隆抗體:由同一B淋巴細(xì)胞群體在應(yīng)答同一抗原時(shí)合成并分泌的抗體,均一且只識(shí)別抗原的同一表位。
多克隆抗體:多個(gè)不同B淋巴細(xì)胞在應(yīng)答同一種抗原時(shí)產(chǎn)生的可特異性結(jié)合該抗原不同表位的抗體混合物,這些抗體分子的組成之間存在一定差異。
制備單克隆抗體的基本步驟:?
(1)用感興 趣的抗原免疫小鼠脾臟,制成B淋巴細(xì)胞懸液。
(2)繁殖小鼠骨髓瘤細(xì)胞。
(3) 將上述B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞系。
(4) 將該細(xì)胞系轉(zhuǎn)移至雜交瘤細(xì)胞才能生長(zhǎng)的選擇性培養(yǎng)基。
(5)用ELISA篩選并找出分泌特異性結(jié)合上述抗原的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株。
(6)對(duì)該細(xì)胞株進(jìn)行擴(kuò)大化培養(yǎng),純化其分泌的單克隆抗體。
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