CY3-NHS ester實(shí)驗(yàn)步驟和條件1032678-38-8星戈瑞
以下是CY3-NHS ester實(shí)驗(yàn)的一般步驟和條件,用于標(biāo)記生物分子(如蛋白質(zhì)或抗體)以進(jìn)行熒光標(biāo)記:
實(shí)驗(yàn)步驟:
1.生物分子準(zhǔn)備:
???- 準(zhǔn)備并純化您的生物分子樣品。確保生物分子在合適的緩沖液中,并且無(wú)明顯的氨基官能團(tuán)修飾。
2.CY3-NHS ester溶液準(zhǔn)備:
???- 根據(jù)供應(yīng)商提供的說(shuō)明,準(zhǔn)備CY3-NHS ester溶液。通常,CY3-NHS ester是以有機(jī)溶劑(如DMSO)為基礎(chǔ)的,因此需要將其在合適的有機(jī)溶劑中制備成合適的濃度。
3.標(biāo)記反應(yīng):
???- 將CY3-NHS ester溶液加入生物分子樣品中,以開(kāi)始標(biāo)記反應(yīng)。反應(yīng)條件通常包括在堿性條件下,通常在pH 8.0-9.0的緩沖液中進(jìn)行。反應(yīng)時(shí)間可以根據(jù)需要進(jìn)行優(yōu)化,但通常在數(shù)小時(shí)到過(guò)夜之間。
4.反應(yīng)停止:
???- 在標(biāo)記反應(yīng)結(jié)束后,您可以使用氨基羧酸(如三甲胺)或其他合適的化合物來(lái)中和未反應(yīng)的CY3-NHS ester。
5.純化和濃縮:
???- 將標(biāo)記反應(yīng)混合物通過(guò)適當(dāng)?shù)募兓椒ǎㄈ缰鶎游龌蚰z過(guò)濾)來(lái)去除未反應(yīng)的CY3-NHS ester和副產(chǎn)物。然后濃縮標(biāo)記的生物分子。
6.濃度測(cè)定:
???- 使用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定標(biāo)記的生物分子的濃度。CY3染料的吸收光譜可用于計(jì)算其濃度。
7.存儲(chǔ):
???- 存儲(chǔ)標(biāo)記的生物分子在低溫(-20°C或更低)和暗處,以減緩熒光信號(hào)的退色和降解。 ? 請(qǐng)注意,實(shí)驗(yàn)中的具體條件和步驟可能會(huì)因所使用的生物分子類(lèi)型、CY3-NHS ester染料和實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)而有所不同。在進(jìn)行CY3-NHS ester標(biāo)記實(shí)驗(yàn)之前,建議查閱相關(guān)文獻(xiàn),以確保獲得最佳的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。此外,實(shí)驗(yàn)應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行,以確保標(biāo)記的生物分子的純度和活性。 ? 【星戈瑞stargraydye】以上數(shù)據(jù)均來(lái)自文獻(xiàn)資料, stargraydye暫未進(jìn)行獨(dú)立驗(yàn)證, 僅供參考!(以上文中所述僅限于實(shí)驗(yàn)室環(huán)境) FITC-PEG-COOH FITC-PEG-FA FITC-N3 FITC-PEG-N3 CY5 amine Sulfo-CY5 amine SiR-azide CY3 amine Sulfo-CY3 COOH