試用！特超敏ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒
產(chǎn)品名稱：BeyoECL Star (特超敏ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒)
供應(yīng)商：上海生物網(wǎng)
貨號：AD000000040
規(guī)格：20ml
特超敏ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒是一種用于檢測蛋白質(zhì)的化學(xué)發(fā)光試劑盒。ECL的全稱是Enhanced Chemiluminescence，即增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光，是一種常用的蛋白質(zhì)檢測方法。
特超敏ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒使用特定的酶（通常是辣根過氧化物酶，HRP）催化底物產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光反應(yīng)。當(dāng)該底物與HRP在存在氫過氧化物的條件下反應(yīng)時(shí)，會產(chǎn)生激發(fā)態(tài)的酶底物復(fù)合物，進(jìn)而釋放出能量并發(fā)出光。該光可以通過攝像機(jī)、光電二極管或熒光成像系統(tǒng)等設(shè)備進(jìn)行檢測和定量。
特超敏ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒具有以下特點(diǎn)：
1. 高靈敏度：能夠檢測低至femtogram級別的蛋白質(zhì)，具有非常高的靈敏度。
2. 寬動態(tài)范圍：能夠檢測廣泛濃度范圍內(nèi)的蛋白質(zhì)，適用于不同濃度的樣品。
3. 高穩(wěn)定性：試劑盒中的成分經(jīng)過優(yōu)化，具有較高的穩(wěn)定性，能夠保持長久的發(fā)光信號。
4. 易于操作：試劑盒提供了簡單易行的操作步驟，可以快速進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
5. 高分辨率：能夠提供清晰、高分辨率的發(fā)光信號，有助于準(zhǔn)確測量和定量分析。
eyoECL Star和BeyoECL Plus的檢測效果對比圖如下。Western檢測過程中僅發(fā)光試劑不同，其余完全相同。
特超敏ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)分析、免疫印跡、酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）等生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中。它可以用于檢測和定量分析蛋白質(zhì)樣品中感興趣的目標(biāo)分子，提供了一種敏感、快速和可靠的蛋白質(zhì)檢測方法。
使用特超敏ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒進(jìn)行蛋白質(zhì)檢測時(shí)，可以按照以下步驟進(jìn)行操作：
1. 準(zhǔn)備樣品：準(zhǔn)備待檢測的蛋白質(zhì)樣品，可以是細(xì)胞提取物、純化的蛋白質(zhì)或其他含有目標(biāo)蛋白質(zhì)的樣品。
2. 制備檢測膜：將樣品進(jìn)行電泳分離，然后轉(zhuǎn)移到蛋白質(zhì)檢測膜上（例如聚丙烯酰胺凝膠膜、聚酰胺膜等）。
3. 阻斷：將膜置于阻斷緩沖液（例如含有牛血清蛋白、非脂干奶粉等）中，在室溫下進(jìn)行阻斷步驟，以減少非特異性結(jié)合。
4. 主抗體孵育：將特異性的一抗主抗體加入含有適當(dāng)濃度的抗體結(jié)合緩沖液中，然后將膜與主抗體溶液一起孵育，以允許主抗體與目標(biāo)蛋白質(zhì)結(jié)合。
5. 洗滌：將孵育后的膜進(jìn)行洗滌，以去除未結(jié)合的主抗體和其他非特異性結(jié)合物。
6. 二抗孵育：將與HRP（辣根過氧化物酶）偶聯(lián)的二抗加入含有適當(dāng)濃度的抗體結(jié)合緩沖液中，然后將膜與二抗溶液一起孵育，以允許二抗與主抗體結(jié)合。
7. 洗滌：將孵育后的膜進(jìn)行洗滌，以去除未結(jié)合的二抗和其他非特異性結(jié)合物。
8. 發(fā)光：將特超敏ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒中的試劑按照說明書的指導(dǎo)加入膜上，并確保試劑均勻覆蓋整個膜表面。注射試劑之后，化學(xué)發(fā)光反應(yīng)會在膜上產(chǎn)生光信號。
9. 檢測和記錄：通過使用光學(xué)成像設(shè)備（如攝像機(jī)、光電二極管等）記錄發(fā)光信號，可以使用相應(yīng)的軟件定量分析蛋白質(zhì)的相對豐度。
BeyoECL Star檢測不同劑量HRP-IgG，20分鐘后發(fā)光效果幾乎不變，120分鐘后發(fā)光效果仍然良好，如下圖所示。
需要注意以下幾點(diǎn)：
- 實(shí)驗(yàn)操作：在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前，要確保操作環(huán)境和儀器器材的潔凈，以避免污染和干擾發(fā)光信號。
- 抗體選擇：選擇特異性的主抗體和二抗，以確保準(zhǔn)確的檢測結(jié)果。根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的特異性，選擇合適的抗體。
- 洗滌步驟：洗滌步驟的次數(shù)和緩沖液的組成可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需要進(jìn)行優(yōu)化，以確保充分去除非特異性結(jié)合物。
- 發(fā)光時(shí)間：發(fā)光時(shí)間可以根據(jù)發(fā)光信號的強(qiáng)度和持續(xù)時(shí)間進(jìn)行優(yōu)化，以獲得最佳的檢測結(jié)果。過長或過短的發(fā)光時(shí)間可能會影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。
總之，在使用特超敏ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒進(jìn)行蛋白質(zhì)檢測時(shí)，要嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，注意樣品的處理和抗體的選擇，以及洗滌和發(fā)光的條件優(yōu)化，以獲得準(zhǔn)確可靠的檢測結(jié)果。
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