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補體C5a(人)ELISA試劑盒,用于體外定量人C5a/C5a-desArg

2023-11-21 15:21 作者:艾美捷  | 我要投稿

補體系統(tǒng)是先天免疫的重要因素。在補體蛋白?5?(C5) 的補體激活過程中,C5?被蛋白水解裂解并產(chǎn)生過敏毒性肽?C5a。 ? C5a?是一種由?74?個氨基酸 (11kDa) 組成的小多肽,來源于 α 鏈的?N?末端。C5a本身的壽命非常短,在血清中被迅速裂解成更穩(wěn)定,但在生物學上仍然活躍的C5a-desArg(也稱為?;碳さ鞍祝珹SP。因此,C5a-desArg?的測量可以得出有關測試樣品中補體活化水平的可靠結論。為方便起見,以下文中將這兩種形式稱為C5a。 C5a?是一種有效的過敏毒素,可引起平滑肌收縮、血管舒張、血管通透性增加、嗜堿性粒細胞和肥大細胞脫顆粒以及溶酶體酶釋放。此外,C5a?是嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞和單核細胞的有效趨化因子。 ? C5a?參與革蘭氏陰性菌敗血癥、創(chuàng)傷、缺血性心臟病、透析后綜合征和多種自身免疫性疾病中的炎癥反應。C5a?升高與晚期動脈粥樣硬化患者的心血管風險增加有關。此外,C5a與骨髓移植后白血病兒童的毛細血管滲漏綜合征密切相關。C5a?也是尿液中用于預測腎移植后急性移植物排斥反應發(fā)作的標志物。 ? 補體級聯(lián)反應的活化產(chǎn)物含有單個天然成分中不存在的新表位。人?C5a ELISA?試劑盒基于一種捕獲單克隆抗體,可識別?C5a-desArg?上的新表位。這可以防止與?C5?發(fā)生交叉反應。 ? 艾美捷補體C5a(人)ELISA試劑盒基本參數(shù): 類型:檢測 量:1 x 96?度,2 x 96?度 標準范圍:0.3?至?20 ng/ml 檢測級別:0.3納克/毫升 工作容積:100?μl/孔 物種:人 交叉反應性:馬?-?不,老鼠?-?弱,豬?-?弱,兔子?-?弱,老鼠?-?弱 儲存及穩(wěn)定性:應儲存在4°C。 在推薦的儲存條件下,產(chǎn)品可穩(wěn)定保存至少六個月。 疾病:傳染病、腎臟病學

補體C5a(人)ELISA試劑盒的應用: 人?C5a ELISA?試劑盒用于體外定量測定血清和血漿中的人?C5a/C5a-desArg。

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原則:

人?C5a ELISA?是一種基于夾心原理的即用型固相酶聯(lián)免疫吸附測定法,工作時間為?3/2?小時。?8?塊板和?5?個一次性?5?孔聯(lián)排的高效形式允許自由選擇檢測的批次大小。 將樣品和標準品在涂有識別人C450a的抗體的微量滴定孔中孵育。 生物素化示蹤抗體將與捕獲的人?C5a?結合。 鏈霉親和素-過氧化物酶偶聯(lián)物將與生物素化的示蹤抗體結合。 鏈霉親和素-過氧化物酶偶聯(lián)物將與底物四甲基聯(lián)苯胺 (TMB) 發(fā)生反應。 通過加入草酸來停止酶反應。 用分光光度計測量5nm處的吸光度。通過繪制吸光度(線性)與人C<>a標準品(log)的相應濃度的關系圖來獲得標準曲線。 與標準品同時運行的樣品的人C<>a濃度可以從標準曲線中確定。

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線性:

通過連續(xù)稀釋含有?331 ng/ml?人?C5a?的樣品來測定測定的線性。在測定中測量稀釋的樣品。該線的斜率為1.0907,相關系數(shù)為0.9988。

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血漿?含有基線水平的人?C5a?的正常人血漿中加入人?C5a,濃度為?10?和?2.5 ng/ml。將含有和不含人?C5a?的樣品在?1°C?下孵育?37?小時。 使用ELISA測量樣品。人C5a的回收率在100%至113%之間。血清含有基線水平的人?C5a?的正常人血清中加入濃度為?5?和?10.2 ng/ml?的人?C5a。將含有和不含人?C5a?的樣品在?1°C?下孵育?37?小時。 使用ELISA測量樣品。人C5a的回收率在89%至102%之間。活化血清含有人?C5a?基線水平的正?;罨搜迮c人?C5a?一起加標,濃度分別為?10?和?2.5 ng/ml。將含有和不含人?C5a?的樣品在?1°C?下孵育?37?小時。 使用ELISA測量樣品。人C5a的回收率在99%至108%之間。

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該試劑僅用于科學研究領域,不適用于臨床診斷或其他用途。

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