正所謂民以食為天，食品安全問題妥妥的就是民生問題。我們目前市面上有更多食品特別是果汁都標(biāo)榜了采用特定水果做原料，但是不知道看文章的你有沒有想過這些食品中是否真的用到了標(biāo)簽中特定水果，還是說根本不含或者含量很少，甚至是掛羊頭買狗頭，在原料中換成了別的低成本的水果。今天小編魯大師就用覆盆子和草莓舉例，給大家分享一下如何用安捷倫2100生物分析儀結(jié)合微衛(wèi)星標(biāo)記（Microsatellite markers）進行食品驗證。

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水果簡介

覆盤子是薔薇科懸鉤子屬的木本植物，果實是聚合果，最常見的是紅色，也被稱為樹莓，味道酸甜可口。除了直接吃之外，這個水果還可以制作飲料和果茶，干燥之后也是一味中藥，主要功效是固腎養(yǎng)肝明目，可以治療陽痿早泄。

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草莓是薔薇科草莓屬的多年生草本植物。我們看到的草莓“果實”其實是一個“聚合大果”。草莓可使用部分是由花托發(fā)育而來，而粉色果肉的一點點白色芝麻狀的才是草莓真正的果實。草莓營養(yǎng)價值豐富，被譽為是“水果皇后”，含有豐富的維生素C、維生素A、維生素E、維生素PP、花青素等營養(yǎng)物質(zhì)。尤其是所含的維生素C，其含量比蘋果、葡萄都高7-10倍。

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實驗概述

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采用安捷倫2100生物分析儀微電泳系統(tǒng)區(qū)分草莓和樹莓果實DNA。這種方法利用了微衛(wèi)星標(biāo)記，可以根據(jù)PCR產(chǎn)物的存在/缺失或大小分化來區(qū)分草莓和樹莓DNA，使用生物分析儀配套DNA1000 芯片（貨號：5067-1504）進行測量。

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微衛(wèi)星標(biāo)記Microsatellite markers

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微衛(wèi)星標(biāo)記是一種特異引物PCR為基礎(chǔ)的分子標(biāo)記技術(shù)，這是一類由幾個核苷酸（一般為1~6個）為重復(fù)單位組成的長達幾十個核苷酸的串聯(lián)重復(fù)序列。每個標(biāo)記兩側(cè)的序列一般是相對保守的單拷貝序列。由于微衛(wèi)星標(biāo)記種屬特異性較強，因此經(jīng)常被運用于植物的鑒定。在本次實驗中運用到的是標(biāo)記是Fvi11和Fvi20

Fvi11是基于一個(GA)16重復(fù)基序，在草莓品種被證實可以提供長度約為137bp的擴增子，但在草莓不同品種之間的擴增子大小上會表現(xiàn)出多態(tài)性。?但是Fvi11不會覆盆子發(fā)生交叉反應(yīng)，因此不會出現(xiàn)擴增子。

Fvi20是基于一個(GA)20個簡單序列重復(fù)基序序列，已被證明在草莓品種中擴增出一個單一或多個長度約162bp的條帶，但與覆盆子(Rubus)品種只會出現(xiàn)一個擴增子。這兩者結(jié)合，可以作為鑒別兩者的依據(jù)。

實驗結(jié)果

結(jié)果表明（圖1），F(xiàn)vi11在含有草莓(a和C)的樣品中，其擴增子約為122bp。在282和290bp處也觀察到額外的擴增子，符合實驗預(yù)期。 Fvi11與含有覆盆子(B和D)的樣品沒有交叉反應(yīng)。陰性對照顯示未檢測到擴增。此外，實驗又檢測了商業(yè)草莓，F(xiàn)vi11顯示了陽性結(jié)果，并在相同的122bp片段，可以斷定該草莓醬確實含有真草莓(圖2)，因此證明本實驗該方法也適用于驗證含有水果的加工食品樣品

在Fvi20實驗中，草莓樣本(A和C)中，得到了在144、162和/或175bp左右的單個或多個擴增子（圖3）。在這一次檢測中，144-bp的片段存在且占優(yōu)勢，而其他條帶的出現(xiàn)的可重復(fù)性較低。將Fvi20標(biāo)記位點應(yīng)用于含有覆盆子樣品中(B和D)的顯示在136bp左右處存在一條單條帶，非常的容易和草莓品種144bp的擴增子特征區(qū)分開來（圖3 和圖4）。同樣的，F(xiàn)vi20也應(yīng)用于檢測市面上銷售的草莓醬樣品中，顯示了143和161bp左右的條帶，表明改草莓醬樣本中確實具有草莓DNA的特征。

總結(jié)

利用植物的微衛(wèi)星標(biāo)記作為區(qū)別草莓和覆盆子的依據(jù)，采用PCR多DNA進行擴增，用安捷倫2100生物分析儀進行了驗證。這個驗證方法不僅適用于鑒別新鮮水果，一樣適用于鑒別用水果作為原料的加工食品。

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