師姐說這是孔老師組的發(fā)家文章（

平滑肌細(xì)胞向內(nèi)膜的遷移是動(dòng)脈粥樣硬化、再狹窄等的關(guān)鍵病理過程。正常情況下SMC包裹在ECM中，當(dāng)基質(zhì)水解酶激活，會(huì)使SMC遷移。

ADAMTS：具有凝血反應(yīng)蛋白基序的崩解素和金屬蛋白酶(ADAMTs);

ADAMTS-7可以直接結(jié)合并可能降解軟骨中的ECM蛋白軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)，并與關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機(jī)制有關(guān)。而COMP在病理ECM重塑和SMC遷移中具有重要作用。于是會(huì)想到ADAMTS-7與血管疾病中平滑肌遷移的關(guān)系。

Result1：ADAMTS-7在頸動(dòng)脈損傷新生內(nèi)膜中的表達(dá)

球囊損傷小鼠模型，取頸動(dòng)脈染色，損傷后ADAMTS-7染色水平明顯更深。免疫熒光染色證明主要定位于中膜。

追蹤損傷后的時(shí)間，在24h內(nèi)ADAMTS-7水平下降，在損傷后4-14天內(nèi)升高，在第7天達(dá)到最大表達(dá)

Result2：促炎細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子在VSMCs中的增強(qiáng)ADAMTS-7表達(dá)

由于ADAMTS-7主要在損傷后血管表達(dá)，于是用不同細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子刺激原代VSMC，在此處特別關(guān)注了TNF-α，其對(duì)ADAMTS-7表達(dá)量的影響呈時(shí)間和濃度依賴性。

Result3：NF - κB和AP-1介導(dǎo)TNF-α在原發(fā)VSMCs中誘導(dǎo)的ADAMTS-7

兩種病毒降低ADAMTS-7的表達(dá)。/////但是這是什么東西啊

Result4：ADAMTS-7促進(jìn)vsmc遷移

腺病毒過表達(dá)ADAMTS-7，細(xì)胞遷移能力增強(qiáng)，活性升高

Result5：ADAMTS-7加重內(nèi)膜增厚

體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，腺病毒直接遞送到損傷血管壁，過表達(dá)ADAMTS-7。損傷后第四天內(nèi)皮細(xì)胞積聚變多。這些更可能是遷移細(xì)胞而非增殖細(xì)胞（why）

損傷后第七天，過表達(dá)ADAMTS-7的血管內(nèi)膜面積更大。

Result6：siRNA敲低ADAMTS-7抑制VSMC遷移

Result7：siRNA敲低ADAMTS-7在體內(nèi)損傷反應(yīng)中改善新生內(nèi)膜形成

上一個(gè)模塊在體外證明敲低ADAMTS-7可以降低內(nèi)皮細(xì)胞的遷移性，這一部分在體內(nèi)驗(yàn)證敲低ADAMTS-7是否可以改善新生內(nèi)膜形成

先用Alexa Fluor 555熒光染色證明了siRNA成功轉(zhuǎn)染?？梢杂^察到內(nèi)膜增厚減弱

從7到14天，ADAMTS-7 siRNA處理的動(dòng)脈新生內(nèi)膜與中膜面積的比例明顯低于scramble siRNA處理的動(dòng)脈。相比之下，兩種處理下外彈性板的介質(zhì)面積和周長(zhǎng)沒有差異。

Result8：ADAMTS-7通過降解COMP促進(jìn)VSMC遷移

在損傷動(dòng)脈中，完整COMP減少，COMP碎片增多，表明在損傷后COMP發(fā)生了降解。

在VSMC中過表達(dá)ADAMTS-7，COMP降解增加。

損傷后7天，頸動(dòng)脈過表達(dá)/敲低ADAMTS-7，觀察COMP降解情況。

COMP本身可以抑制內(nèi)皮細(xì)胞遷移、增殖，減小內(nèi)膜厚度。

這篇文章的最大貢獻(xiàn)是發(fā)現(xiàn)了ADAMTS-7，以及可能參與下游的COMP。不過COMP部分做得并不深入。

總結(jié)一下思路：首先測(cè)損傷后ADAMTS-7表達(dá)（免疫熒光染色，追蹤時(shí)間做western），探究表達(dá)量上升的原因（用不同生長(zhǎng)因子刺激VSMC，確定TNF-α，然后確定中間的AP-1和NF-κB），然后是ADAMTS-7的功能（促進(jìn)細(xì)胞遷移、增殖、加厚損傷后內(nèi)膜等等，幾乎每一項(xiàng)都做了體內(nèi)/外和腺病毒過表達(dá)/siRNA敲低的雙向驗(yàn)證），然后驗(yàn)證COMP的參與（過表達(dá)/敲低ADAMTS-7，看COMP的降解情況）。不太明白的是最后一步，研究COMP可以抑制遷移等功能（疑惑的點(diǎn)：感覺很突兀，難道前人沒有研究嗎？另外如果確實(shí)沒有研究過，這一部分為什么沒有同時(shí)處理ADAMTS-7和COMP？文中不處理ADAMTS-7只處理COMP的做法并不能確定COMP參與這條通路吧？）