潛在治療候選藥物的成功開(kāi)發(fā)不僅需要有效的靶點(diǎn)參與，還需要關(guān)鍵特性，例如足夠的藥物穩(wěn)定性、臨床使用的可管理配方以及將不良副作用最小化。RNAi?療法快速增長(zhǎng)，但依然面臨與遞送系統(tǒng)、化合物穩(wěn)定性、免疫激活和靶向/離組織效應(yīng)相關(guān)的幾個(gè)障礙。RNAi?藥物的特異性和效力是核苷酸序列的固有特性，而其他重要特征直接受對(duì)寡核糖核苷酸骨架的修飾控制。自遞送?RNAi (sdRNA)?分子不需要遞送劑或賦形劑。合成寡核糖核苷酸的化學(xué)修飾降低了對(duì)核酸酶的敏感性，通過(guò)測(cè)試?2'-O-甲基、硫代磷酸酯和?2'-氟修飾的不同組合，研究人員獲得了在暴露于血漿或?CSF 3?天后仍具有穩(wěn)定性的化合物。并展示了?sdRNA?降低?PTEN（磷酸酶和張力蛋白同源物）的表達(dá)以刺激受傷成人?CNS?中再生軸突再生的能力(圖?1)。在成年大鼠視神經(jīng)損傷后，通過(guò)玻璃體內(nèi)注射測(cè)試?PTEN?靶向?sdRNA?化合物的體內(nèi)功效。

此外，RNAi?可以誘導(dǎo)免疫刺激，并且某些序列基序是?siRNA?免疫原性的決定因素，尤其是富含?U?的鏈。重要的是，眾所周知，免疫誘導(dǎo)不僅依賴于?siRNA，而且依賴于傳遞載體的影響。因此，由于這些化合物的自我遞送性質(zhì)，能夠放棄對(duì)遞送載體或配方復(fù)合物的需求，是潛在地減少不良影響的重要一步。在人類?PBMC?的基于細(xì)胞的測(cè)定中測(cè)試了?BA-434-007?的免疫激活，發(fā)現(xiàn)幾乎沒(méi)有誘導(dǎo)?TNF?或?IFIT。此外還檢查了大鼠眼睛和視網(wǎng)膜是否有任何炎癥跡象，這是軸突再生實(shí)驗(yàn)中的一個(gè)重要混雜因素。使用?BA-434-007，同時(shí)控制內(nèi)毒素水平和整體純度，沒(méi)有一只大鼠表現(xiàn)出任何炎癥跡象。這些數(shù)據(jù)表明，使用?sdRNA?可以降低體內(nèi)?PTEN?表達(dá)，這增強(qiáng)了成年?CNS?神經(jīng)元損傷后的再生（圖?2），提高了該方法可用于其他臨床相關(guān)神經(jīng)系統(tǒng)適應(yīng)癥的可能性。

這項(xiàng)研究報(bào)告了使用?sdRNA?技術(shù)生成候選反義治療劑的情況，該治療劑無(wú)需任何額外的賦形劑或載體即可用于降低?CNS?中靶蛋白的表達(dá)。我們選擇將?PTEN?表達(dá)的降低作為測(cè)試該技術(shù)平臺(tái)的一種手段，以測(cè)試該技術(shù)平臺(tái)能否提供可刺激?CNS?損傷后軸突再生的治療劑。這種?siRNA-膽固醇化合物能夠有效地將裸露的雙鏈?RNAi?誘導(dǎo)寡核苷酸滲透到中樞神經(jīng)元中，并且可以在單次注射后特異性降低靶蛋白的表達(dá)，在這個(gè)范例中，至少?14?天后?-注射。軸突在?CNS?損傷后不會(huì)自發(fā)再生，我們選擇?PTEN?是因?yàn)樗ㄟ^(guò)基因敲除的抑制已被確定為克服神經(jīng)再生內(nèi)在障礙的最有希望的方法之一。??

原文鏈接：https://doi.org/10.1016/j.isci.2022.104379