8-異前列腺素是前列腺素的一種異構(gòu)體，能廣泛的應(yīng)用于臨床醫(yī)療它是一種有效地腎臟和肺的血管收縮劑，可以指示肝腎綜合癥或者肺的氧化毒性，同時(shí)，它還以作為抗氧化缺陷的標(biāo)記；它還存在于血清，血漿和整個(gè)細(xì)胞周邊環(huán)境.正常人8-異前列腺素的含量為40-100pg/ml.

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開(kāi)曼生物8-異前列腺素檢測(cè)Elisa試劑盒，是基于競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)，經(jīng)乙酰膽堿酯酶示蹤的8-異前列腺素與游離的8-異前列腺素相互競(jìng)爭(zhēng)其與兔抗血清中有限的結(jié)合位點(diǎn)的原理來(lái)定量樣本中8-異前列腺素的含量.

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艾美捷?8-異前列腺素檢測(cè)Elisa試劑盒特點(diǎn)：

該試劑盒是根據(jù)免疫競(jìng)爭(zhēng)的原理簡(jiǎn)單穩(wěn)定的定量血液，尿液和其他生物樣本中的8-異前列腺素，其靈敏度為10pg/ml,最低檢測(cè)J限為2.7pg/ml.穩(wěn)定期為一年，保存于-20.

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異烷是非酶源的二十烷酸家族，由組織磷脂被氧自由基隨機(jī)氧化產(chǎn)生。異前列腺素在組織和血漿樣品中以人工制品的形式出現(xiàn)，在長(zhǎng)期或不適當(dāng)?shù)膬?chǔ)存過(guò)程中經(jīng)歷了氧化降解。在正常情況下，它們也出現(xiàn)在血漿和尿液中，并因氧化應(yīng)激而升高。

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至少一種異前列腺素，8-異前列腺素（8-異前列腺素F2α），已被證明具有生物活性。它是一種有效的肺和腎血管收縮劑，并被認(rèn)為是肝腎綜合征和肺氧中毒的致病介質(zhì)。2 8-異前列腺素被認(rèn)為是抗氧化劑缺乏和氧化應(yīng)激的標(biāo)志物，在重度吸煙者中發(fā)現(xiàn)水平升高。8-異前列腺素水平也是含脂樣品（如血清、血漿和全細(xì)胞制劑）樣品完整性的相對(duì)指標(biāo)。健康志愿者血漿中含有適量的8-異前列腺素，隨著受試者年齡的增長(zhǎng)而增加。正常人尿中8-異前列腺素的濃度可能比許多酶衍生的類二十烷酸高一個(gè)數(shù)量級(jí)。

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本試驗(yàn)基于8-異前列腺素和8-異前列腺素乙酰膽堿酯酶（AChE）結(jié)合物（8-異前列腺素示蹤劑）之間的競(jìng)爭(zhēng)，以獲得數(shù)量有限的8-異前列腺素特異性兔抗血清結(jié)合位點(diǎn)。由于8-異前列腺素示蹤劑的濃度在8-異前列腺素的濃度變化時(shí)保持恒定，因此能夠結(jié)合兔抗血清的8-異前列腺素示蹤劑的量將與孔中8-異前列腺素的濃度成反比。該兔抗血清-8-異前列腺素（游離或示蹤）復(fù)合物與先前連接到該孔的兔IgG小鼠單克隆抗體結(jié)合。清洗培養(yǎng)皿以去除任何未結(jié)合的試劑，然后將Ellman試劑（含有要進(jìn)行乙酰膽堿酯酶的底物）添加到培養(yǎng)皿中。這種酶促反應(yīng)的產(chǎn)物具有明顯的黃色，并在412nm處強(qiáng)烈吸收。分光光度法測(cè)定的該顏色強(qiáng)度與結(jié)合到該孔的8-異丙醇烷示蹤劑的量成正比，該示蹤劑的量與孵育期間孔中存在的游離8-異丙醇烷的量成反比。

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一般預(yù)防措施：

?分析前，所有樣品必須不含有機(jī)溶劑。

?AEBSF（Pefabloc SC?）和PMSF抑制乙酰膽堿酯酶。本試驗(yàn)中不應(yīng)使用含有這些蛋白酶抑制劑的樣品。

?采集后應(yīng)立即對(duì)樣品進(jìn)行分析；不能立即進(jìn)行分析的樣品應(yīng)在-80°C下，在0.005%BHT（每1ml樣品10μl 5 mg/ml乙醇溶液）的存在下儲(chǔ)存。在-20°C下儲(chǔ)存不足以防止8-異丙醇的氧化形成。9 BHT在水中的溶解度有限。當(dāng)BHT添加到水溶液中時(shí)，可能會(huì)形成沉淀。

?兔源性樣品可能含有通過(guò)結(jié)合小鼠抗兔IgG涂層板干擾分析的抗體。我們建議在本試驗(yàn)中使用之前對(duì)所有兔子樣品進(jìn)行純化。

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干擾測(cè)試：

通常，組織培養(yǎng)上清液樣品可使用Elisa緩沖液稀釋，并直接添加到分析孔中。血漿、血清、尿液以及其他非均質(zhì)混合物（如灌洗液和抽吸物）通常含有可干擾分析的污染物。在進(jìn)行大量樣本測(cè)量之前，最好先檢查是否存在干擾。為了測(cè)試干擾，稀釋一個(gè)或兩個(gè)試樣，以獲得每個(gè)試樣至少兩種不同的稀釋度，介于~5和100 pg/ml之間（即20-80%B/B0）。如果樣品的兩種不同稀釋液在最終計(jì)算的8-異丙醇濃度中顯示出良好的相關(guān)性（相差20%或更?。?，則不需要純化。若你們看不到不同稀釋液的良好相關(guān)性，建議進(jìn)行純化。

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灌洗液和抽吸物：

某些灌洗液可能未經(jīng)凈化就進(jìn)行分析。不能立即進(jìn)行分析的樣品應(yīng)在-80°C條件下，在0.005%BHT的存在下儲(chǔ)存（見(jiàn)第13頁(yè)的一般預(yù)防措施）。一定要在與樣品相同的介質(zhì)中稀釋標(biāo)準(zhǔn)溶液。注意：如果您獲得不一致的結(jié)果，SPE或免疫親和純化是有保證的。

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尿：

一般來(lái)說(shuō)，尿液樣本可以用Elisa緩沖液稀釋，并直接添加到微孔中。不能立即進(jìn)行分析的樣品應(yīng)在-80°C條件下，在0.005%BHT的存在下儲(chǔ)存（見(jiàn)第13頁(yè)的一般預(yù)防措施）。注意：如果您獲得不一致的結(jié)果，SPE或免疫親和純化是有保證的。