干貨:組織學常用的染色劑和染料
法國解剖學家Bichat在1801年引入“tissue”的概念,之后在19世紀 “tissue science”成為一門學科。德國解剖學家卡爾·邁耶(Karl Meyer) 于1819年第一次提出“histology”這一名詞。組織學家依靠現(xiàn)成的化學物質(zhì),借助于染色劑和染料,研究人員將特定的組織結(jié)構(gòu),細胞、組織甚至微生物中的化學元素形象化。本文主要概述一些組織學常用的染色劑和染料。

1., 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI)? 藍色
a.1971年,由奧托丹恩(Otto Dann)的實驗室首次合成,用于錐蟲病治療藥物。
b.選擇性地與雙鏈DNA結(jié)合,沒有(或極少)細胞質(zhì)染色,可作為綠色或紅色熒光標簽的復(fù)染劑。
c.可用于哺乳動物、細菌和后生動物細胞的DNA染色。
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2.Acid Fast(AF) 紅粉色
a.也稱為Ziehl–Neelsen染色,首次在19世紀發(fā)現(xiàn),使用很廣泛。
b.一種重要的鑒別染色劑,識別耐酸的細菌生物,如分枝桿菌和諾卡氏菌屬。
c.對于診斷結(jié)核病尤為重要。
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3.Alkaline phosphatase ?紅/紫色
a.通用的干細胞膜標記物。
b.通常用于在重組流程的早期階段篩選菌落(染色維持干細胞的生存能力)。
c.也可以作為一個陰性選擇工具在生長后期識別未分化的細胞。
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4.Bielschowsky Stain 背景黃到棕色
a.由Max Bielschowsk引入的一種銀染方法,對Ramon y Cajal的方法進行了一些改進。
b.可以用來觀察神經(jīng)纖維,經(jīng)常用于研究阿爾茨海默氏癥。
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5.Gram Stain 革蘭氏陽性細菌:深藍色;革蘭氏陰性菌:紅粉色
由Hans Christian Gram于1884年發(fā)現(xiàn)。這種染色劑將細菌歸類為革蘭氏陽性細胞(例如葡萄球菌),通常有較厚的肽聚糖網(wǎng),或革蘭氏陰性細胞(如大腸桿菌、沙門氏菌),通常在肽聚糖外有一種脂多糖層。
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6.Congo Red 淡橙紅色
雖然已經(jīng)發(fā)現(xiàn)一段時間了,仍然是診斷學家們在組織中鑒定淀粉樣蛋白的“黃金標準”測試(最常發(fā)生在阿爾茨海默氏癥患者身上)。
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7.Grocott-Gomori's Methenamine Silver 黑色
a.一種“廣譜”真菌染色,比PAS染色更能檢測出甚至是退化和死的真菌。
b.對碳水化合物染色特別有用。
c.用于真菌感染的一般篩檢。
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8.Hematoxylin and Eosin 蘇木精和伊紅
a.最常用的“通用染色劑”用于常規(guī)的組織準備。
b.在1876年,一名化學家Wissowzky聯(lián)合使用了蘇木精和伊紅染色。
c.核:藍色(蘇木精); 內(nèi)質(zhì)網(wǎng):藍色(蘇木精); 彈性纖維:粉紅色(伊紅); 網(wǎng)狀纖維:粉紅色(伊紅); 網(wǎng)狀纖維:粉紅色(伊紅); 紅細胞:橙色/紅色
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9.Hoechst stain 赫斯特染色?? 藍色
a.Hoechst染料特異性地與雙鏈DNA的A/T豐富區(qū)域結(jié)合,沒有(或極少)細胞質(zhì)染色。
b.與DAPI相比,這些染料毒性更小,細胞滲透性更強。
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10.Luxol Fast Blue
a.它是一種銅酞菁染料,它可溶于酒精,被吸引至在髓鞘脂蛋白中發(fā)現(xiàn)的堿基。
b.通常用于檢測中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的髓鞘。
c.通常伴隨一個復(fù)染劑。
d.髓鞘纖維:藍色或藍/綠色; 神經(jīng)元:紫色(復(fù)染色時); 紅細胞:藍色
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11.Methylene Blue? 亞甲藍?? 藍色
陽離子染料,與組織中的陰離子結(jié)合,如羧酸、硫酸和磷酸基團。
12.Oil Red O
與蘇丹染料密切相關(guān),用于在新鮮的冷凍組織切片中顯示脂肪或脂質(zhì),也用于法醫(yī)病理學,以增強油性手指產(chǎn)生的潛在指紋。
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13.Periodic-acid Schiff
a.用于研究或診斷糖原貯積病或基底膜疾病。
b.蘇木精通常用作反染色劑觀察其他組織元素。
c.當PAS被用于染色真菌生物時,首選的是淺綠色的反染色劑。
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14.Perl’s Prussian Blue
a.重要的染色劑,用于識別含鐵血黃素沉積的患者,例如在某些肝臟疾病或溶
血性貧血。
b.鐵沉淀物:藍色或紫色; 其他組織成分:紅色(用中性紅復(fù)染)
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15.Toluidine Blue
a.有助于在電子顯微鏡下染色樹脂-嵌入組織薄片,以幫助進行樣品的定向和可
視化。
b.肥大細胞顆粒和多糖:紫色;核, 細胞質(zhì), 紅細胞, 膠原纖維:藍色
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16.Trichrome
a.使用三種(酸性)染料來產(chǎn)生不同的(基本)組織元素的顏色的技術(shù)。
b.這種染色通常用于診斷實驗室評估肝病,如肝硬化。
c.各種各樣的染色方法存在,其中Masson’s Trichrome和G?m?ri’s Trichrome是最常用的。
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17.Verhoeff-van Gieson Stain
a.Verhoeff組件是一種鐵-蘇木精染色劑,而van Gieson組件則是一種膠原特
b.異性的復(fù)染劑,由苦酸和酸性品紅組成。
c.用于證實組織中彈性纖維的存在與否。
d.彈性纖維和細胞核:黑色(Verhoeff成分);膠原蛋白和肌肉:紅色(van Gieson成分);細胞質(zhì)細胞質(zhì)及其他成分:黃色
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18.Warthin-Starry?? 微生物:深棕色到黑色
a.硝酸銀為基礎(chǔ)的染色法
b.被認為是檢測革蘭氏陰性生物的最佳方法,如小型桿菌和螺旋體。