EvaGreen染料——定量實時PCR的重要作用
EvaGreen?染料是一種綠色熒光核酸染料,其特征使得該染料可用于多種應(yīng)用,包括qPCR和DNA熔解曲線分析、嗜熱解旋酶依賴性擴增(tHDA)的實時監(jiān)測和毛細管凝膠電泳。染料本身基本上是非熒光的,但在與dsDNA結(jié)合時變得高度熒光。DNA結(jié)合的染料具有與熒光素(FAM)或SYBR非常接近的激發(fā)和發(fā)射光譜 綠色I,使其易于與配備有488 nm氬激光器或具有該區(qū)域波長的任何可見光激發(fā)的儀器兼容。
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艾美捷EvaGreen#31000染料在熱和水解方面都非常穩(wěn)定,在常規(guī)處理過程中提供了便利。EvaGreen?與SYBR不同,染料不滲透細胞膜,因此無致突變性和細胞毒性 綠色I,它迅速進入細胞,是一種強大的突變增強劑。
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EvaGreen的獨特性能 染料使其在定量實時PCR(qPCR)應(yīng)用中特別有用。與廣泛使用的SYBR相比 綠色I,EvaGreen?染料通常對PCR的抑制性較小,并且不太可能引起非特異性擴增。因此,EvaGreen?染料可以以比SYBR高得多的染料濃度使用 綠色I,產(chǎn)生用于液滴數(shù)字PCR、實時PCR和熔解曲線分析的高分辨率信號。
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EvaGreen qPCR主混合液,用于靈敏、價格有競爭力的qPCR試劑。Biotium還有噻唑綠色,1000 X的DMSO溶液。
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EvaGreen特點:
低PCR抑制:顯示出比SYBR低得多的PCR抑制 綠色I通過智能“按需釋放”DNA結(jié)合技術(shù) ?
高靈敏度:染料的低PCR抑制允許較高的染料濃度用于大得多的qPCR和熔解曲線分析信號 ?
無致突變性和無細胞毒性:標準艾姆斯試驗無致突變性和細胞毒性;?完全不透細胞膜 ?與快速PCR方案兼容 ?對PCR的最小干擾使得可以顯著縮短鏈延伸時間 ?
與多重PCR兼容:當以推薦濃度使用時,擴增子之間無染料遷移 ?
優(yōu)質(zhì)的熱穩(wěn)定性、化學(xué)穩(wěn)定性和光穩(wěn)定性:在PCR緩沖液中在95-100°C下持續(xù)48小時沒有可檢測的染料分解;?在堿性或酸性條件下高度穩(wěn)定;?可承受反復(fù)凍融循環(huán) ?
光譜與SYBR相似 綠色島:兼容所有主要品牌的qPCR儀器和酶系統(tǒng)
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EvaGreen屬性:
探測細胞定位:PCR/qPCR, HRM
對于活細胞或固定細胞:500/530 nm(含?DNA)
檢測類型/選項:20X(25?微米)
細胞滲透性:儲存在?-10?至?-35?°C